小鼠ICSI新技术及其用于提高人类辅助生殖技术的研究.pdf

导师签名:本易彩学位论文作者签名中:呛痜学位论文作者签名:鼋日日签字日期:辍耭易学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与本学位论文作者完全了解直昌太堂有关保留、使用学位论文盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权直昌太堂可以将学位论文的全本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ字日期:沙“年石月,的说明并表示谢意。签字日期:纠阹月,二日
////疷摘要■■■———■■■■■■■■■■■—!!!!!!!R籌!!!!觥!觥!!觥!!!!!!!!!t !觥!R胞质内单精子注射琁是世纪年代发展的一种新型辅助生殖技术,其实质就是用注射针携带单个精子直接注入到卵子胞浆内从而带到受精的目的。的建立为许多不孕不育夫妇带来了福音,目前已成为治疗男性不育的一种常规治疗手段。然而由于缺少合适的动物模型,阻碍了人类研究。小鼠卵子是一个非常理想化的动物模型,但因小鼠卵子体积较小、抗损伤能力弱等原因,小鼠研究进展缓慢。直到年等人将瞧饔糜谛∈舐袸呕竦昧私细叩氖舐殉苫盥省⑹精率及囊胚率。然而,由于甀Ч晃榷ㄇ掖嬖谇痹诘墓廴径拗屏其在临床及科研上的应用。本文是对一项新研发的技术.,甀的应用和改进。狪的方法为:将固定针做成状的开口,先用固定针吸入部分透明带及胞质,然后直接用常规的尖口注射针插入卵胞质中,进行抽吸破膜并注射精子。现对实验结果归纳如下:①比较卵子行和甀奶逋夥⒂%,。鼠卵行甀恼J芫省⒙蚜崖始吧i┡呗史直鹞ァ%和%,与甀钜觳幌灾%、%、%,。甀虲的囊胚率差异也不显著%,,但都显著低于激活组ィ。优化和改善甀氖笛樘跫残砜梢蕴岣叱赡衣省②比较固定针开口内径及固定针吸入胞质长度这两个主要参数的不同组合对囊胚率的影响。结果发现当固定针为氖焙颍炎拥某苫盥式系%显著低于固定为穆殉苫盥省6蔽氚食ざ任保成囊率%和%灾陀诖蟛糠制渌楹希蛘哒J芫始ǖ只有%,其余为三倍体或多倍体6惫潭ㄕ肽诰段饰氤ざ任卵子成活率、正常受精率、囊胚率。与内径为嗟保诰穆蚜崖拭飨缘陀谀诰段穆蚜崖省6惫潭ㄕ肽诰段胞质吸入长度为傻玫娇晒鄣某苫盥剩J芫剩蚜崖剩i┡率和囊胚率,故将该组参数视为最佳甀跫为⋯’畉一·
③建立大批量小鼠卵子冷冻技术,。┙舛掣此盏男∈舐炎又胁⒔岷狭俅睮柿希梢耘定部分临床过程失败的原因。④将甀罴烟跫糜谌司幼⑸涫舐训目缥镏諭冉喜煌娜司子制动时间对鼠卵激活能力的影响。实验表明:用人精子对鼠卵行甀得到%以上的成活率、%以上的受精率和%的卵裂率;并发现人精子在制动诩せ钍舐训哪芰γ挥蟹⑸浠以上结果表明,本研究建立了一种高效、便捷、对鼠卵损伤较小的新方法。用人精对鼠卵行甀〉昧撕芎玫男ЧH欢潭ㄕ胛氩糠职的变形是否会对胚胎的后期发育有影响仍值得进一步研究。尽管如此,由于该方法的简单实用性,值得我们在临床及科研上尝试使用。关键词:胞质内单精子注射;喇叭形固定针;鼠卵:成活率;囊胚率;跨物种间摘要
.蟱,篛%,%%,..②甀.,%;%.瓾瑃.,,瑃篢,.%,甀%,狪甌瑃狪
.甒%—%%%琫.,瑆瓾,;;;,
目录第一章前言‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.哺乳动物的正常受精⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.的研究历史⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.小鼠的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯的理论知识⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..!.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。广泛用于治疗男性不育⋯。。。⋯。...⋯⋯⋯⋯⋯⋯...籼用于治疗雄性小鼠不育⋯⋯⋯..⋯.用于转基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯治疗的安全性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.本论文的研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第二章材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.:⋯实验动物