高效重组苜蓿中华根瘤菌的构建及其耐盐性研究.pdf

华中农业大学
硕士学位论文
高效重组苜蓿中华根瘤菌的构建及其耐盐性初探
姓名:宫世勇
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:周俊初
20060601
摘要苜蓿品种草原一号,公农一号和图牧二号。结果表明:除用屺又滞其中重组菌畃和檫对诓菰缓藕凸┮缓诺闹仓甑,、葀和的结瘤与共生固氮效率的影响还与植物品种有关。关键词将克隆有四碳二羧酸转移酶基因,万泓基因和发光酶基因闹刈橹上部分干重和鲜重较出发菌明显提高。此外,导入和拈私基因对受体菌,一弘,俎V谢8鼍采痰P剩脱涡粒髂妆驹咏环直鸬既胲俎8鼍鶫琀玫等鲎R平雍献印=徊奖冉涎芯縏在自生培养条件下传代的稳定性,实验结果证明在无抗性选择的情况下,连续转接次以上,,分别将鲎R平雍献雍统龇⒕又牧二号以外,供试重组菌接种的植株比出发菌在根瘤鲜重、植株地上部分鲜重、根瘤数、瘤重、植株地上部分干重等方面都有一定的提高,表明导入额外拷贝的以基因与以基因可以提高出发菌的共生固氮能力。就草原一号和公农一号而言,导入重组质粒的转移接合子可以提高植株地上部分鲜重、植株地上部分干重。但在图牧二号上,和其野生型菌株相比,在上述方面并未表现出明显的提高,,%浓度对供试菌株生长有明显的抑制作用,而苜蓿在%浓度以上环境下就无法生长和结瘤。高效固氮重组曹蓿中华根瘤茁的构建和及其耐盐缝韧探
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研究生挠锄帆耐年/月劫日签名日期:.珈名年/月矿日导师签名:夕支痮华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书如需保密,,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,,“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定”,印学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版,并提供目录检索和阕览服务,,,::签名日期:注:请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间学位论文是否保密.,
把根瘤菌是一类无芽胞、能运动、好气或微好气的小杆状革兰氏阴性细菌,大小一般为.,鞭毛周生、端生或侧生。根瘤菌与豆科植物形成的共生固氮体系在农业生产中具有重要的作用。空气中约%的氮气不能被植物直接利用,只有固氮微生物具有将氮气转化成氨的能力,人们称为生物固氮。在共生固氮系统方面,世界上有豆科植物郑渲幸阎?梢越崃龉痰5挠嘀郑占%,而对其共生固氮体系进行过研究的只占%,据联合国粮农组织甏致怨兰疲蛎磕暧缮锕潭ǖ牡A恳呀幌嗟庇蛩,约占全球植物需氮量的。所以,,迄今为止所发现的绝大多数固氮微生物均不能在粮食作物水稻、小麦、玉米以及多种果树、蔬菜上固氮。即使少数可以的话,其固氮量也很少,所以这些植物的高产不得不依赖化学氮肥。年后我国人口将达到亿,年需粮食,总计需尿素0创诵枰#辽倩挂P陆ê芏嗟7厂,,适量使用化学氮肥可使粮食高产;另一方面,生产化学氮肥要大量消耗能源,加重大气污染和温室效应。大量施用化肥,不仅提高农业生产成本,而且导致水土污染,,降低化肥用量和农业生产成本,减少水土污染和疾病,治理占我国国土面积约%的荒漠化地区,发展可持续农业,生物固氮将起重要作用。现代农业单位面积产量不断增长,在一定程度上依赖于氮素化肥施用量的不断增加,这种依赖于氮素化肥获得的增产实际上是以消耗能源和污染环境为代价取得的。由于在氮素化肥生产中伴随着能源耗费和日趋严重的环境污染问题,人们逐渐认识到生物固氮体系在农业生产中的重要作用。生物固氮通过生物能和复杂的生理生化过程固定大气中的游离氮素,将其转变为能参与生物体新陈代谢的氨态氮,是地球上维持生产力的一个重要生态反应。应用现代科学技术建立和完善生物固氮体系己经成为解决人类目前所面临的人口、粮食、能源和环境等问题的重要技术措施。目前,生物固氮研究已经被列为“国际生物学计划”