艾滋病诊断.pptx

HIV / AIDS
一、实验室检查
二、诊断、鉴别诊断
三、预后及预防
实验室检查
一般检查
白细胞、血红蛋白、红细胞及血小板均可不同程度减少,尿蛋白常阳性
免疫学检查
1、淋巴细胞检查
1)淋巴细胞总数下降;
~*109/L(800~4000个/ul)
2) CD4+T细胞下降;
~*109/L(800~1200个/ul)
3) CD4+/CD8+ ﹤1。
±
其他
链激酶、植物血凝素等皮试常阴性,免疫球蛋白、β2微球蛋白可升高
链激酶是从β-溶血性链球菌培养液中提纯精制而成的一种高纯度酶。促进体内纤维蛋白溶解系统的活力,使纤维蛋白溶酶原转变为活性的纤维蛋白溶酶,引进血栓内部崩解和血栓表面溶解。
植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一种有丝分裂原,主要用于激活免疫细胞—淋巴细胞,是一种干扰素诱导剂。
血生化检查
血清转氨酶升高、肾功能异常等
病毒及特异性抗原、抗体检测
1、抗-HIV检测(p24抗体、 gp120抗体)
先用敏感性高的ELISA法初筛,连续两次(+)者,再用特异性高的 WB(蛋白印迹法)或SRIP(固相放射免疫沉淀试验)
等确认。
HIV抗体的初筛试验——ELISA(酶联免疫试验)
HIV抗体的确证试验——Western blot (蛋白印迹试验)
聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
2、  抗原检测
ELISA法检测血清HIV p24抗原
测定p24抗原
敏感性很高(7~10 pg/ml)
特异性稍差(可有假阳性)
有助于抗体产生窗口期和新生儿早期感染的诊断
RT-PCR-HIV-RNA
PCR-HIV前病毒DNA
3、  HIV病毒载量测定
了解疾病进展、提供病毒治疗依据,评估治疗效果、指导治疗方案调整以及早期诊断提供参考
HIV RNA检测——RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)
PCR:高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃);经25~30个循环,成倍数扩增
荧光定量PCR:比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针(带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子)
应用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血浆中的病毒RNA
5、耐药检测
6、蛋白质芯片
其他检查
X线检查
痰、支气管分泌物或肺活检
粪涂片
脑脊液检查
血或分泌物培养
组织活检
HIV /AIDS诊断
1、流行病学资料
不安全性生活史、静脉注射毒品史、输入未经HIV抗体检
测的血液或血制品、HIV抗体阳性所生子女或职业暴露史等
2、临床各期表现
3、实验室检查
诊断HIV / AIDS必须是经确证试验证实HIV抗体阳性
HIV RNA 和P24抗原的检测能缩短抗体“窗口期”和帮
助早期诊断新生儿的HIV感染