作业名称
制作人:刘亚超
专业: 2011级生物技术学号:2220**********
α-淀粉酶的合成与应用
框架
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淀粉酶的产生菌及酶的特性
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淀粉酶的纯化和提取
淀粉酶的用途及展望
1 淀粉酶的产生菌及酶的特性
淀粉酶可由微生物发酵产生, 也可从植物和动物中提取, 目前工业生产上都以微生物发酵法进行大规模生产淀粉酶。
随着淀粉酶的用途日益扩大,产量见增多。生产水平也逐步提高近些年我们国家的酶制剂行业发展较快,从 1 9 6 5年开始应用解淀粉芽孢杆菌BF一7 658生产淀粉酶,当时仅无锡酶制剂厂独家生产。近年,国内生产酶制剂的厂家已发展到 l2O多个,其中约有4O左右的I厂生产淀粉酶,产品也由单一的常温I业用α一淀粉酶,发展到现在有工业用也有食品鼓,既有常温也有耐热的,剂型上有固体的也有液体淀粉酶。
选种
世界上许多国家都以枯草杆菌,地衣芽孢杆菌产细菌淀粉酶和米曲霉生产的真苗淀粉酶为主要产品,在工业生产中使用的菌种,最初都是从自然中得到的,通过筛选和诱变育种工作, 可改变菌种的特性,提高α-淀粉酶的活力。
9798为出发菌株,用Y射线,NTG以及uV反复7次诱变,使其α-淀粉酶的产量为原苗株的25倍Andreeva 等将枯草杆菌孢子悬浮液经 50℃加热处理30分钟,酶合成速度提高了2-,可见采用诱变育种是行之有效的方法,但也有一定的局限性和缺点,由于发生平顶效应使之育种效果降低. 随生物工程技术的发展基因工程技术已应用到菌种的改造方面。Palvar2等把解淀粉芽孢杆菌α-淀粉基因克隆到枯草芽孢杆菌中,其α-淀粉酶活力比其原始的野生型苗株高500倍。我国在利用基因重组构建耐热性α一淀粉酶方面已取得一定的进展。何超刚等将脂肪嗜热芽孢杆菌淀粉酶基因质粒带人大肠杆菌,使后者具有生高淀粉酶能力。任大明0将带有淀粉酶基因的克隆片段,在枯草杆菌中得到表达。朱卫民将枯草杆菌a-淀粉酶基因在大肠杆苗中的得表达。
二淀粉酶的纯化和提取
为了提高收率、降低成本, 对酶回收所做努力不亚于改进发酵工艺。从发酵液作成酶翩剂所用单元操作主要是固液分离、浓缩、沉淀以及干燥、粉碎。其中固液分离是个关键。由于发酵液固型物呈胶质状, 特别是细苗发酵液带阴电荷。固液分离困难,必须通过聚电解质絮凝剂处理,再在硅藻土等助滤剂存在下用板框压滤机过滤工业酶制剂有液体和固体两种形态,液体酶是除菌浓缩液加入稳定剂和防腐剂,再标准化而成。固体酶最简便方法是将浓缩酶液喷雾干燥,或者用盐析和溶剂沉淀的方法。
目前我国对 a 一淀粉酶下游工程的研究做了许多工作。王玉华发现在发酵液中加硫酸铝 0 .4 7 .再加分子量 2 0 0万的聚丙烯酰胺 2 9 4 mm ol / l絮凝,漏斗中过滤可提高 2 9倍。刘叶青”报导用磷酸钙凝胶絮凝α-淀粉酶发酵液,再辅以离子高分子絮凝剂进行淀粉酶絮凝提取是可行的。赵铭等将发酵液用高分子絮凝剂处理,小型板框压滤机过滤达 l 5 .9 L / r n b,而不絮凝者无法过撼。
三淀粉酶的用途及展望
淀粉酶的用途极为广泛,不同来源的淀粉酶,具有不同的性质,不同性质的酶具有不同的用途。黑曲霉酸性淀粉酶适用于制造助消化的药物。米曲霉的α-淀粉酶耐热性较差,用于面包工业。糖化塑细菌淀粉酶因产物具有较多的麦糖,可用以制造
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