诱变和原生质体融合联用选育谷胱甘肽高产酵母菌株.pdf

塞垡三查堂竺主堕壅生兰堡堡兰——————————————一诱变和原生质体融合联用选育高产谷胱甘肽酵母菌株摘要和生物量较对得到的蚐直鸾凶贤庥毡洹⒘蛩岫阴ビ毡浜投,,实现谷胱甘肽的国产化迫在眉睫。本文对谷胱甘肽高产菌株的选育及培养条件进行了研究。鸵恢晟锪拷细叩亩运墙械ケ短宸掷搿筛选和鉴定从中挑出谷胱甘肽含量较高的单倍体菌株高的单倍体菌株。者的复合诱变,并对突变株进行氯化锌和乙硫氨酸交替的抗性物筛选。和生物量较高的单倍体酵母菌株,物量比出发单倍体提高%,谷胱甘肽的产量比发单倍体进行单亲灭活融合。摸索了原生质体制备和再生的条件及融合条件,谷胱甘肽由于其特殊的功能正在被应用各种领域,雨我国的谷胱从株不同种属的酵母菌中挑选出一株谷胱甘肽含量较高的二倍最终得到胞内谷胱甘肽含量较高的单倍体酵母菌株,琙。其中,,,的生提高%。对性状优良的两亲株,体酿酒酵母—琙‘,,.
/。谷胱甘肽产在摇瓶中对融合子的培养条件和培养基进行了优化。通过对融合子培养条件的考察得到较优培养条件:培养温度。嘌初始为,接种量为%,∑孔耙毫课嘌奔姿嵫挝狵蚄。正交实验确定最佳浓度为经过筛选、鉴定得到兼有双亲优良性状的融合子。其生物量为Γ响,确定合适的碳源为工业葡萄糖,有机氮源为酵母粉,无机氮源为疞;考察了不同的无机盐的影响,确定在培养基里添加疞的、蚄。优化后的谷胱甘肽产量为实验考察了半胱氨基酸的添加量和添加方式的影响。>呕蠊入赘孰牡牟勘瘸龇⑺ū短鍄分别提高了ズ.%。利于谷胱甘肽产量和含量的提高,半胱氨酸的添加应该是一次性的添量比两亲株分别提高了%和%。Q芯苛瞬煌荚础⒌T春土姿嵫味匀诤献覴⒔蜕鶪的影酵母粉疞,葡萄糖疞,/扔呕疤岣吡%。比较了不同种类的氨基酸对融合子积累挠跋欤腚装酸、谷氨酸、甘氨酸、蛋氨酸都能够提高康ǘ韵赴纳ご进作用不明显甚至有不同程度的抑制。其中半胱氨酸的效果最明显,添加量为疞,此时的谷胱甘肽产量为在半胱氨酸总的添加浓度相同的条件下半胱氨酸添加的越早越有谷胱甘肽含量为/炔惶/琄疞,北京化工大学硕士研究生学位论文
关键词:谷胱甘肽,酵母菌,菌种选育,原生质体融合,发酵优化加而不是少量多次的进行。北京化工大学硕士研究生学位论文
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緉¨一之;⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯体积比⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..赖氨酸⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.交配型⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..胞嘧啶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯吸光度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯转种⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯交配型⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯精氨酸⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯组氨酸⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯均值虼趸郊姿⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯转种⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.极差⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯圆周率~~;一北京化工大学硕士研究生学位论文~,¨一.
北京化工大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的人承担。月学位论文作者签名:日
掣人~☆/\耍痀景第一章文献综述牟谷胱甘肽结构和性质定方法,国外己经进行了很多研究,国内直到上个世纪九十年代才有一些研究报子结构如图。早在年陀蒬..紫却咏湍钢和阐明其化学结构并加以合成昀媒湍钢票腹入赘孰牡淖钤缱还原型谷胱甘肽虺艷且恢止惴捍嬖谟诙⒅参锖臀⑸锵赴械木有重要生理功能的活性三肽⋯,自年,紫仍诮湍赋樘嵛镏蟹⑾止胱甘肽以来,科学家们一直在努力研究它在各种生物体内的含量及其相应的生理作用,并逐渐发现它在医药、食品、饲料及其它行业上的重要用途,鉴于其有着各种重要作用,近年来,谷胱甘肽日益被人们所重视。对于谷胱甘肽的生产及测道。本章阐述了谷胱甘肽的结构和重要理化性质、功能和应用、生产方法、分离还原型谷胱甘肽,简称,,是由谷氨酸,:铣擅和谷胱甘肽合成酶饬礁鲂蚬崦傅拇嬖谙鹿钩傻幕钚匀其分分离出来,年得到结晶,随后又在动物肝脏、人体的肌肉中分离得到谷胱甘肽⋯。年琄等提出谷胱甘肽为三肽,年由从图中的结构式可知,肫渌募暗鞍字视兴煌姆肿又杏幸提纯和测定方法,并且综述了谷胱甘肽的各种应用。利发表㈣。。图入赘孰牡幕Ы峁北京化工大学硕士研究生学位论立
谷胱甘肽的生理功能基使