杆菌肽锌预混剂质量标准.doc

杆菌肽锌预混剂质量标准
杆菌肽锌预混剂
Ganjuntaixin Yuhunji
Bacitracin Zinc Premix
本品为杆菌肽发酵液与锌盐反应后的喷雾干燥物与碳酸钙等辅料配制而成。含杆菌肽锌按杆菌肽计,%~110%
【鉴别】⑴ ,加磷酸盐缓冲液()—吡啶—5 mol/L盐酸溶液(31∶9∶20)的混合液10ml,充分搅拌15分钟,滤过,取滤液,%,加水1ml,置水浴中加热5分钟,即显深紫色。
⑵在组分与相关肽项下记录的色谱图中,供试品溶液杆菌肽B1、B2、B3和A峰的保留时间应与杆菌肽锌标准品溶液相应四个峰的保留时间一致。
【检查】粒度本品应全部通过二号筛。
组分与相关肽取本品适量(约相当于6000杆菌肽单位),置50ml量瓶中,加4%乙二胺四乙酸二钠溶液()稀释至刻度,磁力搅拌30分钟,离心5分钟,取上清液滤过,取续滤液作为供试品溶液,取杆菌肽锌标准品适量,用上述4%乙二胺四乙酸二钠溶液溶解并稀释制成每1ml中约含120杆菌肽单位的溶液,作为鉴别用标准品溶液。照高效液相色谱法(附录36页)测定,×250mm,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,粒径为5μm;以甲醇-水-
磷酸盐缓冲液(,加水100ml使溶解,%)-乙腈(26∶12∶4∶2)为流动相;柱温度为30℃;检测波长为254nm;流速为每分钟1ml。峰谷比Hp/Hv应≥(Hp为基线以上到杆菌肽B1峰顶的高度,Hv为基线以上到杆菌肽B1和B2峰之间的曲线最低点的高度)。精密量取供试品溶液与标准品溶液各20μl,分别注入高效液相色谱仪,记录色谱图至杆菌肽A峰保留时间的3倍(以杆菌肽A的保留时间15分钟~20分钟为宜;如有必要,可保持甲醇和乙腈比例不变,调整流动相中水与磷酸盐缓冲液的比例)。出峰顺序依次为杆菌肽C1、C2、C3、B1、B2、B3、A和F,、、、、、、1、。按下式分别计算,%,杆菌肽(A+B1+B2+B3)%,杆菌肽(C1+C2+C3)%,%。
杆菌肽(C1+C2+C3)含量%=r+C1r+C2rC3?100% r总面积
杆菌肽(A+B1+B2+B3)含量%=rA+rB1+rB2+rB3?100% r总面积
杆菌肽A含量%=rA
r总面积
rF
r总面积100% 杆菌肽F含量%=
式中 r
和; 100% 总面积为供试品溶液色谱图中杆菌肽C1、C2、C3、B1、B2、A和F峰面积之
rA+rB1+rB2+rB3为供试品溶液色谱图中杆菌肽A、B1、B2和B3峰面
积之和; rA为供试品溶液色谱图中杆菌肽A峰面积;
rF为供试品溶液色谱图中杆菌肽F峰面积。
锌盐锌对照品溶液的制备精密量取锌对照品溶液适量(,置250ml量瓶中,加1mol/L盐酸溶液80ml使溶解并用水稀释至刻度,摇匀,每1ml中含锌(Zn)10mg),