茯苓高产优质菌株的复壮技术探究.pdf

贵州大学
硕士学位论文
茯苓高产优质菌株的复壮技术研究
姓名:诸发会
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:刘作易
20080501
摘要茯芩高产优质茵株的复壮技术研究茯苓..&且恢指叩鹊W泳ナ粲诓阋鸶邱蘧緼,多孔菌科茯苓属,多年生的腐生真菌。其地下生长的菌核是~种传统的名贵药食用真菌,具有较好的营养价值和药用价值。茯苓野生资源极为有限,难以满足市场的需求。茯苓的人工栽培虽早己实现,但在贵州尚未形成规模化的栽培基地,菌种退化成为限制其发展的瓶颈之一。本课题通过一系列研究初步建立茯苓菌株的复壮体系,为实现茯苓的亟ㄉ韬凸婺;於ɑ 本研究对茯苓菌核进行组织分离,对分离菌株进行菌丝形态及荧光核染色显微观察。并分别采用了紫外光照射培养、菌丝尖端转接分离、茯苓菌核分离复壮和单孢分离复壮,结果表明四种复壮方式均可达到一定的复壮效果,将菌丝尖端转接分离与单孢分离复壮法结合是比较理想的复壮方式。对培养基成分、光照条件、培养温度、传代次数等对茯苓菌株在实验室条件下形成子实体的最适培养条件进行了研究。结果表明,茯苓菌株子实体产生的最适培养条件为:在马铃薯琼脂糖培养基希嘌露±℃,光照强度%光照培养箱ù问一掌喽允6プ笥遥嘌奔,形成的子实体形态和数量各不相同,可形成蜂窝状、山状、迷宫状、小菊花状或针状的子实体,单身或群生。采用稀释法分离茯苓单孢子,并进行单孢子萌发实验。结果表明在。跫孢子萌发率最高,为%。担孢子萌发形成的菌丝较为浓密,呈白色短绒状,气生菌丝不明显,生长缓慢。单孢萌发菌丝形成的菌落形态、菌丝生长速度和气生菌丝浓密程度均有明显差异,且遗传稳定性好。单孢配对实验表明,同一菌株担孢子间配对都出现明显拮抗线,但其中少数配对随着培养时间增加在交接区形成扇形区域,拮抗线随后消失。而不同菌株担孢子间的配对则全部形成稳定的栅栏型菌落,不能栽培试验结果显示,不同茯苓菌株野外栽培两次采挖菌核重量不等,大部分菌株第二次采挖重量明显多于第一次茯苓的重量,菌核品质因不同菌株而异。采用索氏提取法测定茯苓菌核的多糖含量。大多数菌株多糖含量在%之间,编号和谐生长。
,为ァF浯问荊关键词:茯苓;菌株复壮;子实体培养;单孢配对;.%..ィ蛔畹偷奈狦晡.%.通过混杂杂栽培的菌株多糖含量在.%之间。
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论文作者签名:苹埝师签名:立赴:掌冢候论文作者签名:诶骸涣原创性声明椎关于学位论文使用授权的声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解贵州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权贵州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑文的研究在做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标期:获芩高产优质首株的复壮技术研究
一、刖茯芩高产优质茵株的复壮技术研究茯苓概述鸚,别称松茯苓、松柏芋、松腴等,是我国传统的名贵中药材。茯苓恰指叩鹊W泳嗫拙芇隶属于层菌纲邱蘧茯苓属约潭Γ,多年生腐生型真菌。医药行业中及日常生活当中所说茯苓均指其地下菌核。茯苓以干燥菌核入药,不同部位经加工分别成为白茯苓、赤茯苓、茯神、茯神木及茯苓皮等药材。其药、食用价值各异。茯苓药性平和,效用广泛,被誉为“除湿之圣药’’、“仙药之上品6嘀址郊僚湮榈囊R┖椭谐梢┑闹匾T稀\蜍卟唤鍪枪诘拇笞药材,也是对外输出的重要商品。茯苓主要分布于我国以及美洲、大洋洲和东南亚等一些国家。在美国、日本、韩国、印度、新西兰等国均有分布。中国主要分布于中部和西南各省,主产于云南、四川、河南、湖北、安徽等省,广东、广西、福建、浙江、贵州、台湾等省也有分布,以云南产出者质佳,故有云茯苓之称。湖北与安徽交界处的大别山区也盛产茯苓,以罗田、英山、霍山、岳西四县最为出名赖龋H斯ぴ耘嘁远酢⒃ァ⑼钊〗唤绲拇蟊鹕角V饕2渲杏忠院笔÷田县、英山县为其道地药材产地。目前茯苓全国年需用量高达肿笥遥瓿口量近吨。经过多年的发展,茯苓已广泛应用于医药及保健食品领域,为大家所熟悉和喜爱。随着我国食品加工工业的发展,将会有越来越多的富有民族特色的茯苓疗效食品问世。而人们生活水平的不断提高和对生活质量的更加