Kernel 呋喃唑酮代谢物说明书(2014-1-7).doc

Kernel 呋喃唑酮代谢物说明书(2014-1-7)
广州市瑞品生物技术有限公司
Kernel?呋喃唑酮代谢物酶联免疫反应试剂盒说明书
(货号:EVAOZ-01)

Kernel? 呋喃唑酮代谢物酶联免疫反应测试盒是用于检测饲料、鱼、虾、肉类组织(牛肉、鸡肉和猪肉)、鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿液中呋喃唑酮代谢物的残留量。该试剂盒
特点包括: ? ? ? ?
快速(4小时),高回收率(80-95%),多种样品的低成本提取方法。高灵敏度(),低检测下限()。检测过程只需要不到1小时。高重复性。

Kernel? 呋喃唑酮代谢物酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有呋喃唑酮代谢物的药物抗原已经包被于微孔板上,在分析时,样品中药物特异性地与抗体相结合。如果药品中有
药物存在,它将阻止包被于微孔板上的药物与抗体结合。当与样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后,只剩下与微孔内药物相结合的抗体,与经酶标记物相结合。反应后颜色深度与样品中呋喃唑酮代谢物的含量成反比。

地址:广州市海珠区新港东路致远街32号电话:020-89883786 89237038 34094537 传真:020-89883786
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1) 酶标仪(450nm)
2) 匀质器
3) 漩涡振荡器
4) 微量加样器(10、20、100和1000?L各一支)
5) 多道枪:50-300?L
6) 乙酸乙酯
7) 正己烷(或正庚烷)
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9) 1M NaOH 1M HCL

实验前请阅读以下文字,以保证获得最佳实验效果。
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9) 标准品中含有呋喃唑酮代谢物,请小心使用。不要使用过期的试剂盒。不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保酶结合物及酶结合物稀释液正确配制。尽量保持室温(±)°C,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加样品。从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。

样品保存在2-4℃不超过1-2天,如果需要保存较长的时间,应该放置-20℃。样品使用前应恢复到室温。
1×样品缓冲液
按1:9的比例配制10×浓缩样品缓冲液和双蒸馏水,举例:取1ml
的10×浓缩样品缓冲液加入到9ml双蒸馏水中,配制成10ml的1×样品缓冲液,按需要,可同比例放大或缩小。
1M盐酸溶液
举例:%盐酸溶液定容到100ml的双蒸馏水中。按需要,可同比例放大或缩小。
1M氢氧化钠溶液
举例:称取4g的氢氧化钠粉末溶解到100ml的双蒸馏水中。按需要,可同比例放大或缩小。
鱼/虾/肉(牛肉/鸡肉/猪肉)
Ⅰ衍生反应
(1) 称取1g匀质样品,加入4mL蒸馏水, 1M HCl和200 μL 衍生化试剂 2-硝基苯甲醛,剧烈振荡1分钟;
(2) 37°C恒温培养16小时,静置过夜,或者60°C恒温培养3小时。
Ⅱ提取步骤
(1) 加入5mL的1×缓冲液, NaOH,6ml乙酸乙酯,涡旋振荡1分钟;
(2) 室温(±)°C下离心力4000g离心10分钟;
(3) 取3mL上清液() 到另一试管(避免触及下层水相!如果移取液中含有水相,再次4000g离心5分钟,取上层有机相),于50°C减压蒸馏或50°C水浴氮气吹干; 地址:广州市海珠区新港东路致远街32号电话:020-89883786 89237038 34094537 传真:
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(4) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥物;
(5) 加入1mL的1