实验五 DMEM培养液的配制
【能力目标】
熟练掌握DMEM细胞培养液的配制。
500mL大烧杯玻璃棒 250mL/500mL盐水
瓶酸度计
微孔滤膜一次性滤器一次性滤纸去离
子水灭活的小牛血清 DMEM干粉青霉
素链霉素 NaHCO3 超净工作台磁力搅
拌器电子天平药匙
【实验材料】
DMEM干粉 1瓶(1,000mL量)
NaHCO3
L-谷氨酰胺
超纯水 1,000mL
【配方】
取清洗干净的500mL大烧杯一个,加入
新鲜制备的三蒸水约300mL,加热至15~
30℃;
将DMEM干粉袋竖立轻弹,使袋中粉下
沉,剪开袋口,将干粉倒入500mL的大烧
杯中,用超纯水冲洗袋2~3次;
放入清洗干净的磁子,在磁力搅拌器充
分搅拌,以确保培养基干粉充分溶解;
【配制方法】
根据配方要求,加入准确称取的NaHCO3
,L-,充分摇匀至完全
溶解;
加入已经制备好的双抗溶液,使青霉素
和链霉素的最终使用浓度达到100μg/mL;
加入培养基总体积约10%的已灭活的小
牛血清;
【配制方法】
%的NaHCO3溶液调整溶液
~,加超纯水定容,并将
培养液转入盐水瓶;
用一次性滤器过滤上述培养液到灭菌的
盐水瓶,封口,4℃保存备用。
【配制方法】
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