薄层色谱法
概念
薄层色谱法(TLC)
将固定相(如硅胶)薄薄地均匀涂敷在底板(或棒)上,试样点在薄层一端,在展开罐内展开,由于各组分在薄层上的移动距离不同,形成互相分离的斑点,测定各斑点的位置及其密度就可以完成对试样的定性、定量分析的色谱法。
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
基本原理
在给定的条件下(吸附剂、展开剂、板层厚度等),化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf值鉴别化合物。
比移值
组分二
组分一
被分离混合物
薄层色谱展开示意图
薄层色谱法
优点
操作简单,定性结果直观
缺点
有一定毒性、定量方面的精密度较差
实验仪器
⑴载板
⑵固定相(吸附剂)或载体
⑶涂布器
⑷点样器
⑸展开室
实验操作
固定相(吸附剂)的选择
纤维素、淀粉
硅酸镁
硫酸钙
硅胶
佛罗里硅土
氧化镁
氧化铝
活性炭
对极性有机物的吸附作用增强
2 供试品的制备:按照各药品质量标准规定的方法进行提取分离。制得的供试品应放置于密塞的小瓶中,防止溶剂挥发影响点样量。3 对照品溶液的制备:可按质量标准规定精配成一定浓度的对照品溶液,置密塞小瓶中备用。标准药材对照溶液,一般需照供试品的制备方法制备。在使用对照品溶液时一定要注意将取样的毛细管充分洗干净,防止造成对照品污染。
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