淋球菌检查
华中科技大学附属协和医院皮肤科林能兴
【适应证】
淋病
【禁忌证】
无
【并发症】
无
【用物准备】
无菌生理盐水、细小棉拭子、扩阴器、载玻片,培养皿,氧化酶试剂等
【操作流程】
1. 分泌物的涂片检查(男性)
1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。
2)戴无菌手套,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,用棉签拭子蘸取脓液,涂于载玻片上,自然干燥后加热固定。
3)革兰氏染色
4)显微镜下观察,在多形核白细胞内发现革兰氏阴性双球菌可明确诊断。
附:革兰氏染色法
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: (口诀1 1 半半)
1)载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)自来水冲洗,去掉浮色。
4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。
5)用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。
6)用蕃红染液复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
(3)对无性交史女性可采集阴道处分泌物。
(4)直肠取材时,应将棉拭子插入肛门2~3cm。
(5)检查淋球菌咽炎时,应从扁桃体及扁桃体窝取材
2)标本取出后立即接种于培养基中,目前常用加入多粘菌素的血液琼脂或巧克力培养基
3)初次分离培养应使用5%~10%CO2浊缸,培养温度36℃为宜,24~48小时后观察
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