亚叶酸钙细菌内毒素检查方法的建立论文.doc

亚叶酸钙细菌内毒素检查方法的建立论文.doc亚叶酸钙细菌内毒素检查方法的建立论文
【摘要】目的建立亚叶酸钙细菌内毒素检查方法。方法参照《中国药典》2005年版二部收载的细菌内毒素凝胶法对亚叶酸钙进行实验。·ml-1后对试验无干扰作用,·ml-1的鲎试剂检查细菌内毒素方法可行,有效。·ml-1的亚叶酸钙其菌内毒素检查法可以代替家兔法来控制亚叶酸钙注射液的质量
【关键词】亚叶酸钙干扰试验细菌内毒素热源检查
前言
亚叶酸钙是一种抗癌药,临床上主要用于治疗晚期结肠、直肠癌1。细菌内毒素检查法有快速、准确、灵敏、经济实用等优点,但2005版中国药典正文规定的热原检查项中,执行家兔检查法。所以本文对亚叶酸钙的热原检查采用细菌内毒素法进行试验,评价亚叶酸钙采用细菌内毒素法的可行性。
1﹑实验材料和仪器

细菌内毒素检查用水:批号:090507,规格:5ml/支湛姜博康海洋生物有限公司。
鲎试剂:批号:0802020,灵敏度:;批号::0802030,灵敏度:;批号:0708280,灵敏度:;批号:0903252灵敏度:;批号:0806020,灵敏度:。
受试品(S):亚叶酸钙注射液:批号:20090902、20090702、20090502,规格::,大连天宇制药有限公司。
细菌内毒素国家标准品:批号:981,效价:9000EU/支湛江安度斯生物有限公司。

H
根据热原检查法1亚叶酸钙注射液,剂量为10ml/kg,可得L=。

2005年版中国药典规定最小有效稀释浓度由下面公式确定:
C=λ/L
~,、、、、,、、、、;

鲎试剂灵敏度的复核试验应按照中国药典2005年版方法规定的条件下进行,鲎试剂的灵敏度用λ表示。
将细菌内毒素国家标准品用细菌内毒素检查用水(BET)溶解,在旋涡混合器上混匀15分钟,然后制成2λ、λ、,每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒。,,每一浓度平行做4管;(BET)作为阴性对照。将试管中溶液轻轻混匀后,封闭管口,垂直放入37℃恒温器中,保温60分钟。结果见表1
表1两种鲎试剂复核试验结果
内毒素浓度EU/
重1++———
复2++———
管3++———
数4++———
注:NC为阴性对照管
λ=lg-1(∑Xx/4)
=lg-1(++lg