白细胞计数 ( white blood cell count ,WBC )
目的
掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法
原理
用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,将稀释液充入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液中的白细胞数量。
器材:一次性微量吸管、乳胶吸头、试管、棉球、2ml移液管,显微镜、改良Neubauer计数板
试剂:白细胞稀释液:2%冰乙酸溶液中加入10g/L结晶紫(或亚甲蓝)3滴。
标本:末梢血或静脉血
操作
加稀释液:。
吸取血液: 用微量吸管吸取末梢血(或抗凝静脉血) 20ul ,擦去管外余血。将吸管插入含白细胞稀释液试管的底部,轻轻放血,并吸取上层稀释液洗管 2~3次。
混匀: 将试管中血液与稀释液充分混匀,直至变成深棕色。
准备计数板:用拭净血细胞计数板和盖玻片,采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片,将其盖在计数池上。
充池:再次混匀,用吸管将稀释液滴入计数板和盖玻片交界处,利用虹吸作用液体顺其间隙充满计数池,室温静置2~3 min,待WBC完全下沉。
计数: 在低倍镜下计数四角4个大方格内的WBC总数。
计算: 白细胞= N/4×10 ×20 ×106/L = N/20 ×109/L
注意事项
因第l滴血混有组织液,应擦去。不能过度挤压,以免组织液混入引起血液凝固或造成计数结果不准确。
保证计数板和盖玻片清洁。
如充池过少、过多或有气泡,拭净计数板及盖玻片后重新操作。
计数池内如细胞分布严重不均,应重新充池。数RBC用高倍镜,计数WBC用低倍镜。
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