试验五 血液葡萄糖的测定 PPT课件.ppt

试验五 血液葡萄糖的测定_PPT课件试验五血液葡萄糖的测定
福林——吴宪氏法
葡萄糖是一种多羟基醛类化合物,具有还原性,在与碱性铜试剂混合加热时,将二价铜还原为砖红色的氧化亚铜沉淀。
+
Cu2+
C
O
OH
Cu2O↓
+
OH
OH
OH
OH
OH
O
氧化亚铜可使磷钼酸还原生成钼蓝,使溶液呈蓝色。生成蓝色的深度与血滤液中的葡萄糖浓度成正比,从而间接测定葡萄糖浓度。
H3PO4·12MoO3
+
Cu2O↓
钼蓝
钼蓝是钼以混合价态所形成的一系列氧化物和氢氧化物混合型化合物之总称。因呈深蓝色。
钼的平均化合价在5~6之间。用不同的还原方式可以得到不同状态的钼蓝。
由温和的还原剂(如二价锡、二氧化硫、联氨或硫化氢等)还原微酸性的钼酸盐稀溶液时,
得悬胶状的钼蓝;后者用于钼的比色测定。由氢化铝锂还原氧化钼,则得晶体钼蓝,
例如:Mo4O10(OH)2及Mo8O15(OH)6等。
浓度测定——分光光度计
分光光度法:是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的分析检测技术.
工作原理
,可以鉴别溶液中所含的物质. 
当一束单色光照射待测物质的溶液时,当某一定频率(或波长)的可见光所具有的能量(hf)恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应(即ΔE=E2-E1=hf)时,待测物将对该频率(波长)的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。由于在一定条件下,吸光度A与待测物质的浓度C及吸收池长度L的乘积成正比,即A= KCL在测得吸光度 A后,可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。
分光光度计
分光光度计的分类:
红外分光光度计: 测定波长范围为大于760 nm的红外光区
可见光分光光度计: 测定波长范围为400~760 nm的可见光区(本次试验波长:420nm) 紫外分光光度计: 测定波长范围为200~400 nm的紫外光
物质的吸收光谱:如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,使得屏上所显示的光谱不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.
实验试剂
1/6mol/L硫酸溶液
葡萄糖贮存标准液
葡萄糖应用标准液
1:4磷钼酸稀释液
碱性铜试剂
10%钨酸钠溶液
抗凝血
磷钼酸试剂
%苯甲酸溶液
实验试剂
实验步骤一、无蛋白血滤液的制备
蒸馏水
全血
2/3N H2SO4
混匀即得血滤液
放置5min,2500rpm离心10分钟,取上清备用.
10%钨酸钠