气象色谱法测定生物柴油脂肪酸甲酯含量(剩余实验)方案.doc

气相色谱外标法测定生物柴油中脂肪酸甲酯含量及求其转化率实验方案
实验原理及方法
采用气相色谱仪准确分别测定生物柴油中的七个主要脂肪酸甲酯(棕榈酸甲酯、棕榈油酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、花生一烯酸甲酯、花生烯酸甲酯)的已知不同含量的峰面积,然后做出响应信号与含量之间的关系曲线,,在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品,从色谱图上测出峰高或峰面积,在从校正曲线查出样品的含量.
求酯化率时利用实验室方法,对少量分析样品采用过量无水甲醇而不除去所产生的甘油,可在碱性催化剂的存在下迅速地使反应达到完全程度.
在测校正曲线相同条件下进同等样量的完全甲酯化样品,从色谱图上测出峰高或峰面积,在从校正曲线查出完全甲酯化的油脂的脂肪酸甲酯总含量.
二、实验条件
1、试剂及仪器
交酯化得到的粗麻疯籽油甲酯;棕榈酸甲酯、棕榈油酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、花生一烯酸甲酯、花生烯酸甲酯色谱标准;正己烷;苯;石油醚;氢氧化钾;甲醇;无水硫酸钠;硫酸氢钠.
气相色谱仪;氢火焰离子检测器(FID);色谱数据处理机;玻璃填充剂;十万分之一电子天平;移液管或移液枪;5ml容量瓶;烧杯;漏斗等.
2、色谱条件
SPL进样口温度270℃;柱温170℃,保留1min,以程序升温方式以3℃/min速率升至210℃,保留1min;FID检测器250℃;;分流比90:1;;;氢气流速:40ml/min;空气流速:400ml/min.
实验步骤
(一)脂转化率测定
1、氢氧化钾甲醇溶液制备
,可轻微加热,加入无水硫酸钠干燥,过滤,,用上清液测定不影响使用.
2、粗麻风籽油甲酯的完全甲酯化
称取粗麻风油脂甲酯试样60mg至5ml容量瓶中,用5ml移液管移取4ml正己烷溶解试样,稍微加热,使试剂溶解;
,盖上玻璃盖猛烈振摇30s后静置至澄清;
向溶液中加入约1g硫酸氢钠,猛烈振摇,中和氢氧化钾;
再加入正己烷定容至5ml;
待盐沉淀后,将含有甲酯的上层溶液移至玻璃瓶,,取平均值.
计算方法
(1)标准单样甲酯校正曲线y=a1x+c1;y=a2x+c2;y=a3x+c3······y=a7x+c7.
(2)交酯化得到的粗麻疯籽油甲酯峰面积为A1;A2;A3;A4; A5;A6;A7;
A1=a1x+c1; 浓度x=B1mg/ml
A2=a2x+c2; 浓度x=B2mg/ml
A3=a3x+c3浓度x=B3mg/ml
······
A7=a7x+c7. 浓度x=B7mg/ml
(3)因为生物柴油稀释了10倍,所以各脂肪酸甲酯的实际浓度为,10B1;10B2;
10B3;10B4;10B5;10B6;10B7..
称量100ul生物柴油的质量为m克.
所以总的脂肪酸甲酯质量为10m(B1+B2+B3+B4+B5+B6+B7)=M1(克).
(4)完全甲酯化时取生物柴油的质量为0、06克,测得其体积为Vml,稀释至5ml容量瓶中,稀