厌氧菌MIC测定方法.docx

厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法
Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria
目次
前言
范围
引用标准
定义
进行厌氧菌敏感试验的指征
厌氧菌敏感试验的局限性
抗微生物药
常规试验和报告中抗微生物药的选择
稀释试验接种物制备
参考琼脂稀释法(Wadsworth法)
10. 微量肉汤稀释法 
-内酰胺酶试验
质量控制的方法
附录:培养基和补充剂的制备
表1:厌氧菌试验应考虑的抗微生物药推荐分组
表2:解释标准和相对应最低抑菌浓度(MIC)值
表3:制备抗微生物药贮存液需要的溶剂和稀释液
表4:琼脂稀释法或微量肉汤稀释法敏感试验中抗微生物药稀释液的制备方案
表5:参比琼脂稀释试验标质控菌株的最低抑菌浓度(MIC)的质控允许范围
表6:微量肉汤稀释试验质控菌株的最低抑菌浓度(MIC)的质控允许范围
前言
临床细菌分离中由于厌氧菌感染日渐增多,厌氧菌的药敏试验和耐药监测已提到日程上。本标准是在卫生部颁发的《全国临床检验操作规程》(第三版)的基础上,依据美国国家临床实验室标准化委员会(mittee for Clinical Laboratory Standards,NCCLS)M11-A5文件-厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法(已批准的标准-第五版)[ISBN 1-56238-429-5],结合中国国情及卫生系统的实际情况和要求制定。
本标准从2004年月日起实施。
本标准由卫生部提出。
本标准起草单位:北京大学人民医院检验科。
本标准主要起草人:张正岳志红。
本标准由卫生部委托卫生部临床检验中心负责解释。
中华人民共和国卫生行业标准
WS/T×××-200× 
厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法
Methods for Antimicrobial Susceptibility 
Testing of Anaerobic Bacteria
范围
本文件所述方法主要用于测试普通分离到的厌氧菌。琼脂稀释法可用于测试大多数厌氧病原菌。目前微量肉汤稀释法仅用于测试脆弱拟杆菌菌群的病原菌。本标准适用于从事厌氧菌抗微生物药敏感试验的临床实验室使用。
引用标准
LS的M11-A5文件和中华人民共和国卫生部医政司编制的《全国临床检验操作规程》(第三版)而制定。
定义

将某一种抗微生物药的系列浓度混入用于敏感试验的琼脂生长培养基进行的抗微生物药敏感试验。 

指该菌株所致感染可以用推荐用于此型感染及病原菌的抗微生物药剂量进行恰当地治疗。

药物在生理浓集的部位具有临床效力或者可用高于正常剂量的药物进行治疗;此还包括一个“缓冲区”可以防止微小的,未能控制的技术因素造成重大的结果解释错误。
耐药
指常规剂量抗微生物药通常达到的浓度不能抑制该菌株的生长和/或该菌株的MIC落于某范围内。在此范围内,可存在某些特定的耐药机制(如β-内酰胺酶类),并且治疗研究显示其临床疗效并不可靠。

琼脂或肉汤稀释敏感试验中抗微生物药抑制某一种微生物可见生长的最低浓度。
进行厌氧菌敏感试验的指征
临床上有厌氧菌感染存在,并在实验室分离出厌氧菌,原则上均应进行抗微生物药敏感试验。
常规试验
从脑脓肿、心内膜炎、骨髓炎、关节感染、人工装置或人工血管感染和菌血症分离到的特殊感染的标本应该测试,并应参考临床医生的合理建议。
当感染的性质不清楚,标本含有内源性厌氧菌菌群,而且病原菌与正在治疗的感染关系很少时,通常不必做敏感试验。当存在多种厌氧菌时,参考临床情况选择可能引起厌氧菌感染的最重要菌种进行敏感试验。一般分离到拟杆菌属、普雷沃氏菌属、梭杆菌属。梭菌属、嗜胆菌属和萨顿氏菌属的一些菌种应做敏感试验。
敏感试验应使用分纯后菌悬液。不能直接用临床标本进行敏感试验。MIC试验一般采用倍比稀释,采用本标准推荐方法,做好质控,结果报告采用在实际终点时的一个倍比稀释范围内较为科学。例如:终点为16μg/mL,真正报告应8μg/ml-32μg/ml范围更好。并做出敏感、中介或耐药判断,以供临床参考。
监测试验
当技术条件不允许每个实验室都进行厌氧菌敏感试验时,建议当地建立参考实验室,收集一定量临床菌株(不少于50-100株),集中测试后公布结果供大家参考。
厌氧菌敏感试验的局限性
体外结果不足以预测某个病人对厌氧菌感染治疗的反应,仅供临床选药参考。此标准的试验方法也并不一定适用于所有的厌氧菌,以下2点需考虑。 
折点和临床相关
关于确定厌氧菌对大多数抗微生物药的敏感性的折点,现在并无一致意见