艾滋病样品采集、处理.ppt

艾滋病样本采集、处理与运输石嘴山市疾控中心艾滋病初筛中心实验室
HIV检测
HIV抗体检测
ELISA
快速HIV检测
免疫印记法( Western Blot)
其他方法:免疫荧光法(IFA)、放射免疫沉淀实验
HIV核酸定性检测
HIV RNA定量测定(病毒载量测定)
CD4+和CD8+T淋巴细胞检测
HIV抗原检测(p24)
样品的采集
艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用样品的采集方法如下:
(一)血清样品采集:用一次性注射器(或真空采血管)抽出一定量静脉血,一般为5mL,放入一次性塑料试管,室温下自然放置1-2小时,待血液凝固和血块收缩后再用3000rpm离心15分钟,吸出血清备用。
(二)抗凝血样品采集:
用加有抗凝剂的真空采血管或用一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。因为肝素是Taq酶的强抑制剂,会使核酸检测出现假阴性结果。如需进行病毒RNA测定,采集的抗凝血应在4-8小时以内分离血浆。
(三)采样注意事项
1、采集样品应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
2、采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层乳胶手套。建议采用真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液。
3、进行静脉抽血时,一定要保证足够的光线,而且采血人员应背靠墙壁,后面不能有人员走动。以防抽血时碰撞,造成意外刺伤。
4、不要把用过的锐利器具(针头)传递给别人;
5、对用过的针头不要用手去重新盖上针套;不要用手从一次性注射器上移去针头;不要用手弯曲、折断或处置用过的针头;
6、用过的注射器及针头直接放到可防止锐利器物刺穿的专门容器中,统一进行高温消毒,115℃,30分钟,然后深埋处理;
7、其它废弃物(酒精棉球、手套)要在作高温焚烧处理;
8、不要将锐利废弃物(针头)同其它废弃物(酒精棉球)混在一起;
9、不要将锐利废弃物放在儿童可以接触到的地方;
10、用肥皂和水认真洗手;
11、采样人员要带乳胶手套、穿隔离衣,避免直接接触体液;
12、处理废弃物的人必须戴厚质乳胶手套;
样品的运送
实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
应采用WHO提出的三级包装系统:
第一层容器:装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有送检单,送检单应与样品分开放置。
样品的运送
第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器:放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签(数量,收、发件人)。