果蝇的杂交—三点测交.ppt

实验五果蝇的杂交—三点测交
一. 目的与要求
了解利用三点测验法绘制遗传学图谱的原理和方法。
学习并掌握实验结果的数据统计处理方法。
二. 原理
位于同一条染色体上的基因一般是随着染色体一起传递的,即这些基因是连锁的。同源染色体上的基因之间会发生一定频率的交换,因此其连锁关系发生改变,使子代中出现一定数量的重组型。重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。
基因在染色体上的相对位置的确定除进行两个基因间的测交外,常用的是三点测交法。
如果蝇 msn3w 三个基因是连锁的(它们都位于X染色体上)要测定三个基因的相对位置可以用野生型果蝇(+ + +)与三隐性果蝇(msn3w)杂交,形成三因子杂种msn3w/+++,再用三隐性个体对雌性三因子杂种进行测交,以测出三因子杂种在减数分裂中产生的配子类型和相应数目。由于基因间的交换,除产生亲本类型的2种配子外,还有6种重组型配子,因而在测交后代中有8种不同表型的果蝇出现,这样经过数据的统计和处理,一次实验就可以测出3个连锁基因的距离和顺序,这种方法就叫做三点测交或三点试验。
三. 材料与方法
:
野生型果蝇: 红眼、长翅、长刚毛
突变型果蝇: 白眼、小翅、焦刚毛
2. 试剂:
100%乙醚、琼脂、红糖/蔗糖、玉米粉、酵母粉、丙酸。
3. 用具:
解剖针、直管瓶、麻醉瓶、棉塞灭菌锅。
4. 果蝇麻醉方法:
将直管瓶中的果蝇快速倒入麻醉瓶中并立即盖上棉塞,
向麻醉瓶的侧口滴加2-3滴100%乙醚,晃动麻醉瓶至果
蝇麻醉。性状观察实验果蝇深度麻醉,杂交实验则轻
度麻醉。
四. 实验步骤
选取处女蝇:选取12小时之内孵化出来的贞蝇
杂交:
正交红眼长翅♀Ⅹ白眼小翅焦刚毛♂
反交白眼小翅焦刚毛♀Ⅹ红眼长翅♂
每瓶放入3—5对果蝇,贴好标签,注明杂交组合,杂交日期及实验者姓名。
野生型
三隐性(白眼、小翅、焦刚毛)
五. 杂交实验安排
确定杂交组合并倒去父、母本亲蝇。
12小时之内挑选贞蝇,正交和反交管各放3对果蝇,置于25℃条件下培养。
杂交后7-10天时倒去杂交亲蝇。
挑选F1代雌雄果蝇各3只进行F2代繁殖。
7-10天倒去F1代亲蝇。
F2代数量及性状分离统计(统计至F1代自交后20天止)。