分析化学21省公开课一等奖全国示范课微课金奖PPT课件.pptx

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第21章
高效液相色谱法
 High-Performance Liquid Chromatography，HPLC
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70年代快速发展
不挥发有机物约占70%
80年代以来HPLC
文件量 21%（89年）
仪器销售量 25%（12 亿）（89年）
应用领域 拓展（化工、环境保护、临床、药品、生命）
超出 GC
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第21章 高效液相色谱 法  High-Performance Liquid Chromatography，HPLC
21－1 高效液相仪
21－2 固定相和流动相
21－3 色谱峰扩展及其影响原因
21－4 高效液相色谱法和主要分离类型
21－5 超临界流色谱
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第21章 高效液相色谱 法  High-Performance Liquid Chromatography，HPLC
1 高效液相色仪
2 固定相和流动相
3 高效液相色谱法和主要分离类型
4 超临界流体色谱
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第21章 高效液相色谱 法21-1 高效液相色谱仪
1、仪器结构
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单柱塞泵结构示意图
第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪 1、仪器结构
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HPLC与GC比较
a. 柱 长:10—50cm 内径:2—5mm
微柱
◎填充柱
微 HPLC 柱 ~ m m
毛细管 HPLC 柱 100~500 μm
纳级 HPLC 柱 10~100 μm
◎拉制 HPLC 柱 50~200μm
◎开管 HPLC 柱 5~10μm
第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪 2、掌握关键点
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微柱优越性：
1、消耗少（样、流动相、固定相）
2、灵敏（溶质在柱上稀释比下降）
3、分离效率高（可装长柱）
4、操作条件易选择
5、其它分离联用易
第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪 2、掌握关键点
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b、检测系统
惯用UV光度检测（包含它当代方法）
引人注目：荧光检测 选择性 10-9~10-11 g/ml
质谱检测 通用性 10-8 g/ml
蛋白质分析
生物质谱
第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪 2、掌握关键点
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C、梯度林洗装置
作用：
让流动相组成随时间而改变，以调整流动相极性、离子强度或pH，使样品组分相对保留值得以改变，从而提升分离效率。
与GC程序升温技术比较
第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪 2、掌握关键点
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