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干扰素释放试验.ppt


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Y干扰素释放试验(interferon.1 release assays),
IGRA是检测结核分枝杆菌(MTB)特异性抗原刺激T细胞产生的Y干扰素,以判断是否存在MTB的感染。IGRAs可弥补PPD试验的不足,目前多个国家已将其用于诊断MTB潜伏感染(1atent tuberculosis infection,LTBI),我国部分医院也已常规开展此项检测
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目前国际上较成熟的IGRAs有2种:
全血法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测全血中致敏T细胞再次受到MTB特异性抗原刺激后释放的1.干扰素水平,称之为全血检测或结核感染T细胞免疫检测;
细胞法:采用酶联免疫斑点技(ellzymelinkedimmunospot assay,ELISPOT)测定在MTB特异性抗原刺激下,外周血单个核细胞中能够释放1一干扰素的效应T细数量,称之为细胞检测或结核感染T细胞检测。
上述2种检测方法的原理类似,检测技术和操作程序略有不同,均采用MTB的RDl区基因编码抗原多肽作为特异性抗原,主要相对分子质量为6 000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相对分子质量为10 000的培养滤液蛋白(CFP一10)抗原或抗原多肽
T-SPOT试验
TB抗原多肽
T细胞
活化T细胞
γ 干扰素
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γ干扰素
检测阴性
γ干扰素
检测阳性
IGRAs的结核特异免疫抗原
SAT-6和CFP一10主要存在于MTB复合群,而在卡介苗和大多数NTM中缺失,因此IGRAs的特异度较好。
但ESAT-6和CFP—10也存在于少数几种NTM中,如堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、苏尔加分枝杆菌、转黄分枝杆菌和胃分枝杆,故IGRAs阳性不能排除上述几种NTM感染的可能。
PPD试验与IGRAs的对比
PPD试验作为诊断MTB感染的传统方法,具有操作简便、成本低廉的特
点,至今仍广泛使用,但该方法使用的PPD抗原成分复杂,易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌(nontuberculosismyeobacterium,NTM)的影响,特异度较低,且对人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足。
荟萃分析结果显示,在HIV感染人群中,IGRAs的敏感度并未高于PPD试验,但IGRAs(尤其是细胞检测)受CD4+T细胞数量的影响小于PPD试验,这可能因为IGRAs检测过程已对单个核细胞数量进行了标准化,即在检测程序上消除了淋巴细胞数量减少对检测结果的影响
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PPD阳性对以下情况无法区分
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LIBI √
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1
卡介苗预防接种√
非结核分枝杆菌感染√
5
4
活跃结核病√
结核病治愈、自愈后√
IGRAs阳性
2
大多数非结核分枝杆菌感染ⅹ
3
LIBI √
1
卡介苗预防接种ⅹ
5
结核病治愈、自愈后√
4
活跃结核病√
2010年 全国结核病流行病抽样调查
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结核分枝杆菌复合群 %,%
2010年广州结核病流行病抽样调查:%,且其中前5位IGRAs为阴性的

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