重组人干扰素生产工艺.ppt

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202X
第十五章 重组人干扰素生产工艺
01
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干扰素概述
02
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基因工程假单胞杆菌的构建与保藏
03
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干扰素的发酵工艺过程
04
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干扰素的分离纯化工艺过程
主要内容
CONTENTS
01
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干扰素的种类
02
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干扰素的理化性质
03
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干扰素的生物学活性
04
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干扰素的临床应用
1 .干扰素概述
CONTENTS
05
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干扰素的生产工艺路线
概念： （interferon，IFN）
干扰素是一种细胞因子，它是机体感染病毒时，宿主细胞通过抗病毒应答反应，而产生的一组结构类似、功能相近的低分子糖蛋白。英文名称为Interferon，简称IFN。
发现：干扰素是1957年英国科学家Isaccs等发现的。他们把灭活的流感病毒作用于小鸡细胞，结果发现这些细胞产生了一种可溶性物质，这种物质能抑制流感病毒，并且能干扰其它病毒的繁殖，因此，他们将这种物质称为“干扰素”。以后科学家们进一步发现，机体对入侵的异种核酸（包括病毒）都产生干扰素以进行防御。当机体细胞受到病毒感染时，机体细胞产生干扰素，干扰病毒复制，它是机体抗病毒感染的防御系统。
干扰素的种类
天然干扰素分类
1. 根据来源、基因序列和氨基酸组成分类I 型干扰素： IFNα、IFNβ、IFN τ、IFN ω
来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等
功能 ：抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调节(较弱）其中IFN-α为多基因产物，有23种以上的亚型。
II 型干扰素：干扰素γ（IFN)
来源：活化的T细胞和NK细胞产生
功能：免疫调节
提高单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力
增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性
抑制TH2细胞形成，下调体液免疫应答
趋化作用
抗病毒和抗肿瘤作用（次要）
2. 根据动物来源确定分类，例如人干扰素（HuIFN），小鼠干扰素（MuIFN）。
上市重组干扰素: α2a、α2b、α1b、 β1b，γ
1992年我国第一个基因工程药物IFN-α1b获得国家一类新药证书。
研发中的重组干扰素：IFN ω，临床阶段

143-166aa；
MW:18-40 ku；
；
乙醚、氯仿敏感
容易吸附玻璃、淀粉、醋酸
纤维膜、琼脂和塑料等介质。

Ⅰ型干扰素具有广谱的抗病毒活性，对多种病毒如DNA病毒和RNA病毒均有抑制作用；但这种效应不是直接的，而是通过对宿主细胞的作用引起的。
①对干扰素敏感的细胞表面存在于干扰素受体，核内有“抗病毒蛋白”基因，受干扰素作用后该基因活化，产生的抗病毒蛋白可阻止病毒mRNA翻译，并促进病毒mRNA降解。
②干扰素能提高细胞表面MHCⅠ类分子的表达水平，受到病毒感染的细胞表面MHCⅠ类分子的增加有助于向Tc细胞递呈抗原，引起靶细胞的溶解。
③干扰素可增强NK细胞对病毒感染的杀伤能力。
正常情况下组织或血清中不含干扰素，只有在某些特定因素的作用下才能诱使细胞产生干扰素。
广谱抗病毒活性机制
2015
病毒复制
2019
IFN-诱导蛋白
2016
抑制病 毒复制
2020
诱导刺激
2017
信号转导
2021
胞核
2018
IFN-a
2022
胞核
抗肿瘤作用机制
型干扰素能抑制细胞的DNA合成，减慢细胞
的有丝分裂速度；这种抑制作用有明显的选择
性，对肿瘤细胞的作用比对正常细胞的作用强
500～1000倍。另外，Ⅱ型干扰素也可通过增
强机体免疫机制、加强免疫监督功能来实现其
抗肿瘤效应。
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02
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05
06