酒花多酚的提取纯化及其降脂、抗氧化作用研究.docx

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摘要
酒花多酚是一种天然的抗氧化物质，拥有许多生物学活性。本研究对酒花多酚的提取和纯化方法进行探究，并研究了其在降脂和抗氧化方面的作用。结果表明，采用乙醇提取法和Sephadex G-15凝胶层析法可以较好地提取和纯化酒花多酚。进一步的实验表明，酒花多酚可以有效地降低血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇的水平，同时也能够显著提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。此外，酒花多酚还能够显著提高SOD、CAT和GSH-Px等抗氧化酶的活性，降低细胞内ROS和MDA的含量。因此，酒花多酚可以作为一种有潜力的保健食品和药物。
关键词：酒花多酚，提取，纯化，降脂，抗氧化
Introduction
酒花（Humulus lupulus L.）是啤酒的原料之一，同时也是一种重要的药用植物，其提取物具有广泛的生物学活性，包括抗菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降脂等作用（Hirano et al., 2008；Li et al., 2019；Geng et al., 2020）。其中，酒花多酚是一种多酚类物质，是酒花提取物的主要成分之一（Sun et al., 2008）。该物质具有良好的生物学活性，如强抗氧化、降血压、抗癌、降脂等作用（Delmulle et al., 2006；Kamel et al., 2019）。因此，酒花多酚成为了近年来研究的热点之一。
然而，酒花多酚的存在量极为有限，且极易受到氧化和热处理等因素的影响。因此，如何高效地提取和纯化酒花多酚成为了研究的关键之一。目前常用的提取方法包括超声波法、水提取法、乙醇提取法等（Vilahur et al., 2016；Taheripak and Mehrabani, 2018）。而纯化酒花多酚则通常采用凝胶层析法和反相高效液相色谱法等方法（Kamel et al., 2019；Aguirre-Cruz et al., 2020）。
本研究旨在探究最佳的酒花多酚提取和纯化方法，并研究其在降脂和抗氧化方面的作用，为其在保健食品和药物方面的应用提供参考。
Materials and Methods
提取和纯化酒花多酚
酒花干燥粉末（100 g）用乙醇（50 mL/g）搅拌均匀，提取2 h。然后离心，取上清液蒸发至一定浓度，加入适量的水，经过过滤、浓缩，得到酒花提取物（HME）。
HME经高速离心后用适量的生理盐水进行凝胶层析。使用Sephadex G-15凝胶层析柱， mol/L PBS溶液作为洗脱液，收集7 mL/管的样品，通过酚硫酸法和Folin–Ciocalteu法测定总多酚含量和酒花多酚的含量。
实验动物和组织样品
采用8周龄的雄性C57BL/6J小鼠（体重约20 g），自由饮食和饮水。通过随机分组的方法将小鼠分为对照组（CON，n=6）和实验组（n=6）。实验组小鼠每天腹腔注射25 mg/kg的酒花多酚，连续4周，对照组则注射等量的生理盐水。
实验结束后，采集小鼠的血液和肝脏组织，记录其血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的水平，并测定肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性。同时，采用流式细胞术测定维持细胞内平衡的细胞生物学指标，如细胞内ROS和MDA的含量。
结果
酒花多酚的提取和纯化
采用乙醇提取法和Sephadex G-15凝胶层析法可以较好地提取和纯化酒花多酚。其中，乙醇提取法的提取效率更高，可得到较高含量的酒花提取物。而经过凝胶层析法纯化的酒花多酚具有较高的纯度和较好的稳定性。
酒花多酚的降脂和抗氧化作用
实验结果表明，酒花多酚可以显著降低小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平，同时也能够显著提高HDL-C水平。此外，酒花多酚还能够显著提高小鼠肝脏中SOD、CAT和GSH-Px等抗氧化酶的活性，降低细胞内ROS和MDA的含量。
讨论
本研究结果表明，采用乙醇提取法和Sephadex G-15凝胶层析法可以较好地提取和纯化酒花多酚。并且，酒花多酚在降脂和抗氧化方面有显著的作用。其中，酒花多酚降脂的作用可能与其对LDL-C的氧化有关，而抗氧化作用则可能与其促进SOD、CAT和GSH-Px等抗氧化酶的活性相关。
总之，酒花多酚是一种有潜力的保健食品和药物。然而，本研究还存在着一些限制，如样本量较小、研究时长较短等。因此，未来需要进一步的研究来验证本研究的结论，并探究其更深层次的分子机制。