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(环境微生物技术)环境检测微生物技术.ppt


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文档列表 文档介绍
第四章环境监测微生物技术
分子水平的微生物监测技术
细胞水平的微生物监测技术
微宇宙的微生物监测技术
环境质量的微生物监测技术
环境质量的微生物监测技术
水质的细菌学检验技术
大肠菌群
(一)原理
(二)方法
多管发酵法
初发酵试验
平板分离
复发酵试验
细菌总数
总大肠菌群
粪大肠菌群
膜滤法
滤膜和滤器的灭菌和安装
过滤水样
培养
计数,涂片,染色观察
再培养
细胞水平的微生物检测技术
发光细菌检测技术
(一)基本原理
(二)操作方法
(三)发光细菌检测法的应用
发光细菌
发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌,这种可见荧光波长在450-490nm之间,在黑暗处肉眼可见。
多数为海洋细菌(低温,高盐)
发光机理
由细菌荧光酶(LE)、还原性黄素(FMNH2)、八碳以上长链脂肪醛(RCHO)、氧分子(02)参与:
FMNH2+LE → FMNH2·LE+ O2 → LE·FM NH2·O2 + RCHO →LE·FMNH2·O2·RCH0 → LE+ FMN +H2O+RCOOH+光
发光细菌急性毒性测试原理
外来受试物主要通过下面两个途径抑制细菌发光:
直接抑制参与发光反应的酶类活性;
抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程。
凡能够干扰或破坏发光细菌呼吸、生长、新陈代谢等生理过程的任何有毒物质都可以引起发光强度的变化。变化的程度与受试物的浓度在一定范围内呈相关关系,同时与该物质的毒性大小有关。
发光强度的变化可以用发光光度计测出。
发光细菌急性毒性测试优点
沙门氏菌回复突变试验
(一)目的和原理
(二)步骤和方法
平板掺入试验
斑点试验
TA97、TA98、TA100、TA102
脂多糖屏障丢失
R因子
紫外线损伤修复缺陷
自发回变
回变特性
(三)Ames试验的应用
Ames试验测试菌之基因型及生物学性状
菌株
自发回变
His—
rfa
pKM101
pAQ1
△uvrB
诊断试验
TA97
90~180
+
+
+
-
+
+
TA98
30~50
+
+
+
-
+
+
TA100
120~200
+
+
+
-
+
+
TA102
240~320
+
+
+
+
-
+
TV
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  • 时间2018-03-17