丹参药材中丹参酮ⅡA含量测定方法改进论文.doc

丹参药材中丹参酮ⅡA含量测定方法改进论文.doc丹参药材中丹参酮ⅡA含量测定方法改进论文
.freell·min-1时,丹参酮ⅡA保留时间在21 min左右,出峰时间较晚,浪费流动相和检测时间。为此,我们对丹参中丹参酮ⅡA含量测定方法的流动相进行了改进。
1 仪器与试药
Agilent 1200高效液相色谱仪,Agilent DAD检测器,Agilent Chemstation工作站(美国安捷伦科技公司)。照品:丹参酮ⅡA(中国药品生物制品检定所,批号:110766 -200416);丹参药材(市场采购);甲醇为色谱纯(天津市科密欧化学试剂开发中心);水为重蒸馏水;其余试剂均为分析纯。
2 方法和结果
药典测定方法1色谱柱为Phenomenex Prodigy ODS3-C18色谱柱( mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(73∶27);检测波长270 nm, ml·min-1,柱温为室温。
改进的测定方法在药典测定方法基础上,改变流动相为:甲醇-水(80∶20),其余和药典方法相同。
供试样品溶液的制备采用《中国药典》2005年版Ⅰ部丹参药材中丹参酮ⅡA含量测定项下的方法制备。
对照品溶液的制备精密称取丹参酮Ⅱ mg,置50 ml棕色瓶中,加甲醇稀释至刻度,另取2 ml置25 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得丹参酮ⅡA对照品溶液( μg/ml)。
线性关系考察按“”项下的色谱条件,分别用自动进样器进5,,10,15,20,25 μl的上述对照品溶液,记录色谱图。以浓度为横坐标,相应的峰面积为纵坐标,线性回归,得方程: Y=1 -,r= 3(n=6),结果表明丹参酮ⅡA 2~ 8 μg间呈良好的线性关系。
精密度和稳定性实验取“”项下的对照品溶液,连续进样6次,记录丹参酮ⅡA的峰面积,计算RSD=%(n=6)。并于室温下放置2,4,6,8,12,24 h后测定,计算测定丹参酮ⅡA峰面积的得RSD=% (n=6),峰面积积分值基本不变。
回收率实验精密称取已知含量的丹参药材样品6份,同“”项下方法,制成供试品溶液,取供试品溶液1 ml,置1 000 ml的容量瓶中,加入丹参酮Ⅱ 0 mg,用甲醇稀释到刻度,采用改进后的方法进行测定,并计算回收率。结果见表1,%,RSD为