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第七章抗原抗体反应及应用
第三节抗原抗体反应的应用
第三节抗原抗体反应的应用
一、免疫沉淀和免疫凝集
二、免疫标记
三、免疫定位分析
四、抗原抗体反应的其他应用
2018/4/25
一、免疫沉淀和免疫凝集
免疫沉淀和免疫凝集利用抗原与抗体特异性反应的特性对抗原或抗体进行量或质的测定分析,是最经典的血清学方法。
特点:特异、灵敏、快速。
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溶液中的沉淀反应
在体外可溶性抗原与相应抗体形成肉眼看见的沉淀物。
在液相中形成的沉淀不容易观察判断,利用抗原和抗体溶液之间的界面形成的沉淀线便于观察。
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对照 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160
抗血清稀释度
抗原
沉淀线
抗血清
环状沉淀实验示意图
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2、凝胶中沉淀反应
抗原抗体在半透明的半固相介质中进行沉淀实验。抗原分子与抗体分子在凝胶介质中自由扩散,相遇形成沉淀。
以琼脂扩散实验较为常用。
单向免疫扩散:抗体混于琼脂中,小孔中加入抗原,抗原向周围均匀扩散,与抗体形成沉淀环。可用于定量测定免疫球蛋白和补体的含量等。
双向免疫扩散:抗原和抗体向周围扩散后可在两孔之间形成白色沉淀线,可用于抗原或抗体的定性检测。
缺点:时间长,灵敏度低。
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免疫双扩散
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3、电泳条件下的沉淀反应
a、免疫电泳:
是利用蛋白质在凝胶中迁移率不同1能被分离的特性与免疫扩散结合进行分析的方法,这种方法能提高分辨率和灵敏度。
实验分二步,先用电泳将抗原各成分依电泳速度不同分开,再进行双扩散,常用此法进行血清的蛋白种类分析,对于免疫球蛋减少或增多的疾病诊断或鉴别诊断有重要意义。
2018/4/25
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b、对流免疫电泳:
是一种将双向扩散和电泳技术相结合的检测方法。即在琼脂板上, 使抗原和抗体在电场作用下定向移动, 当抗原抗体相遇且二者浓度比例合适时, 即可出现白色沉淀线。
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