三峡大学医学院生物化学教研室
实验四酶的竞争性抑制
问题1:本次实验提取的是什么酶?
问题2:该酶位于细胞的什么部位?催化
什么化学反应?
琥珀酸脱氢生成延胡索酸:
琥珀酸脱氢酶
FAD
FADH2
延胡索酸
(fumarate)
琥珀酸
(inate)
问题3:如何检测琥珀酸脱氢酶的活性状况?
在体内,琥珀酸脱下的2H经电子传递链传递,最后与氧结合生成水,并释放出能量。
在体外可利用甲烯兰(蓝色)作为人工受氢体,接受琥珀酸脱下的2H而被还原为甲烯白(无色)。
蓝色消褪的快慢可显示琥珀酸脱氢酶的活性。
问题4:何为竞争性抑制?
问题5:本次实验中的抑制剂是什么?为何
选择该物质作为抑制剂?
问题6:如何设计实验方案检测酶被抑制的
程度?
竞争性抑制:分子结构与底物相似的抑制剂与底物竞争结合酶的活性中心,抑制酶活性。
Ki:EI的解离常数,抑制常数
EI不能转变成产物
草酸、丙二酸与琥珀酸分子结构相似,是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。
COO
COO
Oxalate
酶被抑制的程度取决于抑制剂与酶的亲和力及与底物的相对比例。
可依据蓝色消褪的时间判断酶活性被抑制的程度。
The effect of petitive inhibitor can be e with high concentrations of the substrate
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