其他常见问题和解决措施.ppt

植物组织培养中常见问题
乳品与农牧技术学院
徐艳玲
复习、引言
(已知)
基础
本次可以达到的目标:组培常见问题:
种类、现象
原因和防治方法
目标
(未知)
(怎样知)
学习的过程
疑问
(想知)
学习组培中常见问题及预防
目标
(能知)
组培的目的?
影响组培成功的因素?
组培污染及防治
材料褐变及其防止
其他常见问题和解决措施
玻璃化问题及其防止
主要内容
组培中常见的问题及解决方法
污染
玻璃化
褐变
主要现象
引言:植物组织培养中容易出现以下三种情况而导致组织失败。
组培中常见的问题
(一)污染来源
一、组培污染及防治
1、真菌:种类丰富,分布广泛,繁殖快速,无处没有,无处不在。
2、细菌:
   细菌是无孔不入的微生物,为避免细菌的侵袭,科学家曾尝试用抗微生物材料生产各种用品,但效果不十分理想,因为这些材料虽然能杀死细菌,却充满了化学物质。
(1)户外风大菌类进屋机会多
(2)屋内太潮菌类繁衍多
(3)物品带菌多
(4)屋内不干净
(5)屋内清理带菌组培苗
(6)接种不正确
一、组培污染及防治
一、组培污染及防治
途径一
途径二
途径三
户外风传播: 菌类细小如尘随风飘散,由上下落,见湿就长有风就有沙,有沙就有尘,有尘就有菌,菌尘混共存。
涡流传播:超净工作台上,摆放物品太多,当无菌风吹过时,就会在物品周围形成涡流群,菌类就会在涡流群中停留。
接种传播: 如果手上带菌较多,在操作过程中,就难免有菌落入培养基或植物材料上,而导致污染。
(三)预防措施
02
保持室内空气干燥,如使用空调“除湿”功能,也可减少真菌生长繁殖。
04
污染物品和污染培养基不要在培养室近距离开瓶洗刷。
经常开窗,保持室内空气流通可以使室内真菌数量减少。通风方法简便易行,应多使用。
01
紫外线能杀灭或抑制真菌生长,对减少室内真菌污染大有好处。
03
一、组培污染及防治
二、材料褐变及其防止
(一)褐变现象
外植体褐变是指在接种后,其表面开始变褐,有时甚至会使整个培养基变褐的现象。它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活,而使细胞的代谢发变化所致。在褐变过程中,会产生醌类物质,它们多呈棕褐色,当扩散到培养基后,就会抑制其他酶的活性,从而影响所接种外植体的培养。
主要原因
生理状态
幼嫩的组织在接种后褐变程度并不明显,而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重。.
品种
由于多酚氧化酶活性上的差异,有些品种的外植体在接种后较易褐变,而有些品种的外植体在接种后不易褐变。
培养方法不当
光照过强、温度过高、培养时间过长等,均可使多酚氧化酶的活性提高,从而加速被培养的外植体的褐变程度。
培养基的成分
浓度过高的无机盐会使褐化程度增加,细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性,从而使褐化现象加深。
二、材料褐变及其防止
(二)褐变原因