鸦胆子粗提物、臭椿粗提物和y-d对tmv、cmv-rna的抑制作用.docx

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学位c毕业,论文作者亲笔虢粒 吼。暑、口阳
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摘 要
烟草花叶病毒(o mosaic virus,TMV)在世界范围内都有分布,可侵染十字花科、茄科、菊科等多种植物,是具有经济重要性的植物病毒之一。黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的寄主十分广泛,能侵染85科1000 多种植物。TMV可以与CMV复合侵染,不仅造成植物品质的下降同时可以造成巨大的经济损失。TMV、CMV引起的病毒病不但危害严重,其防治也相当困难。
鸦胆子(Bruceajavanica亿.)Merr)、臭椿(Ailanthus altissima Swingle)均系苦木科(Simaroubaceae)植物果实,为传统中药。在本实验室以前的研究中,已经得出,在接种TMV , mg/%%;分别利用半叶法和叶碟法测定了
鸦胆子素D的抗TMV侵染和增殖作用,结果为, 侵染效果达到75%以上,而在2x10-3mg/mL的浓度下其抗TMV增殖作用仍达到 60%。
Bruticine D(Y_D)、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对TMV有很好的抑制增殖的作用,为了研究Y-D、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对TMV核酸、CMV核酸在寄主体内的增殖情况的影响,本实验采用-]" RT-PCR的方法,对 TMV-RNA的复制酶基因、外壳蛋白基因(CP)、运动蛋白基因(MP)、烟草内
参基因(actin gene)和CMV-RNA3分别进行了退火湿度优化、M92+浓度优化、循环次数优化,进一步研究接种TMV 6h的普通烟K326和接种CMV 12h的假酸浆(Nicandra physalodes(L.)Gaertner),用Y-D、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对其处理48h,检测三种药剂对TMV、CMV的RNA的抑制作用。同时采用quantitive PCR的方法,检测Y-D对TMV-RNA、CMV-RNA的抑制作用,对TMV基
因组、TMv—CP亚基因组和TMV—%、%和 95。820,0。两种方法的结果是相同的,不仅确定了Bruceine D、鸦胆子粗提物、。同时证明了 RT-PCR实验结果的正确性,证明-了semi—quantitative RT-PCR技术的可靠性,在相对定量的研究中,由于荧光实时定量PCR仪价格昂贵,当条件有限时,如果操作得当,半定量PCR法可以替代荧光定量PCR法,得到应用。但对 ,似并不能就此断定二三
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种药剂对CMV没有抑制增殖的作用,也就不能做出Bruceine D、鸦胆子粗提物、臭椿粗提物三种药剂对+ssRNA病毒在寄主体内不具有广谱的抑制作用,还可以从蛋白等方面进一步研究药剂的抗病毒作用。
关键词:TMV;CMV;Bruticine D、鸦胆子、臭椿粗提物;抑制作用
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Abstract
o mosaic virus is distributed in the call infect many kinds of plants of Cruciferae、positae,is one of economical important plant
mosaic virus’s host is very widespread,Can infect 85 families 1000
kind p