唾液淀粉酶最适pH值的测定实验梁世秀.docx

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验
2012级10班4组梁世秀
:1掌握设计性实验的基本思路,并完成设计报告
。
。
:,在适宜条件下,酶催化活性最高时,反应体系的PH值称为最适PH值。本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受PH影响的情况。碘液与淀粉的不同程度水解的产物反应呈不同颜色,即:淀粉(蓝色)、紫色糊精(紫色)、红色糊精(红色)、麦芽糖及葡萄糖(黄色)。
—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在淀粉在不同PH下水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将淀粉完全水解时,淀粉遇碘呈蓝色,吸收波长位于660nm处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同,吸光度值也不同。因此,通过测量660nm处的吸光度值,可以了解PH对酶促反应的影响,吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。
:试管、试管架、洗耳球、小烧杯、坐标纸、37℃恒温水箱、722型可见分光光度计、吸量管(1ml 5ml 10ml)试剂药品:、碘液、、、蒸馏水
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1、缓冲液的配置:根据下表,配置各个pH值的缓冲溶液各10ml
pH 值
磷酸氢二钠
磷酸二氢钠
2、唾液的获取:
:蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,,将下嘴唇搁在烧杯边缘,让唾液自然流入试管中.
,用蒸馏水漱口,清除口腔内的食物残渣,再在口腔内含蒸馏水,并作漱口运动,3分钟后吐入垫有两层经润湿过处理的脱脂纱布漏斗里,过滤于小烧杯备用。

管号 1 2 3 4


唾液(稀释10倍)
混匀,37摄氏度水浴5min,再加2滴碘液
混匀,观察其颜色变化,选颜色适中,记录其用量
蒸馏水
:取4支试管,分别编上号0~3管号
管号 0 1 2 3
唾液(ml) 1
蒸馏水(ml)
稀释倍数 5 10 20 25


管号 0 1 2 3
稀释倍数 5 10 20 25


37摄氏度水浴5min,然后每管加入2滴碘液
蒸馏水 6 6 6 6
混匀,观察颜色适