沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定.doc

沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定.doc沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定
【关键词】沙苑子; 沙苑子苷A; 对照品
沙苑子为豆科植物扁茎黄芪Astragalus planatus [1],能温补肝肾、固精、缩尿、明目,用于治疗肾虚腰痛,遗精早泄,白浊带下,小便余沥,眩晕目昏;始载于《图经本草》,名为白蒺藜。

沙苑子主要含有黄酮类、三萜类、有机酸类、氨基酸等。黄酮类成分是沙苑子的主要有效成分,具有许多药理活性。近年来研究认为沙苑子总黄酮可保护大鼠重要器官免受运动损伤,明显提高大鼠的运动能力[2],抑制肝纤维化形成[3],抗肿瘤[4~6],此外对SHR和RHR[7~8]有明显的降压作用。但有关沙苑子的质量标准中,由于缺少化学对照品,尚无沙苑子黄酮含量控制指标,2005年版的《中国药典》中沙苑子的质量标准也仅有性状、显微、荧光检测等内容。为了进一步研究和完善沙苑子的质量标准,迫切需要研制一种或多种对照品。沙苑子苷A是沙苑子黄酮的主要特征性成分,且在沙苑子中的含量较高,也是沙苑子保肝抗肝纤维化的主要有效成分之一。本文从沙苑子中提取、分离和纯化沙苑子苷A,制备沙苑子苷A对照品,为制定和完善沙苑子及其制剂的质量标准提供沙苑子苷A对照品。
1 仪器与材料

美国Nicolet公司FT-IR Magna-550红外光谱仪(KBr压片);美国VARIAN公司INVOA-400超导核磁共振谱仪核磁共振仪;美国ABI Qtrap2000液相色谱-质谱仪;英国MICROMASS GCT OA-TOF高分辨质谱仪;惠普7530-GUV/VIS紫外光谱仪;岛津LC-20A高效液相色谱议,SPD-M20A二极管阵列检测器, SP1色谱工作站;eoH:,;IRKBRMAX 3 (γOH),1 (γC=O),1 ,1 (Ar):1 (Ar-O-C),1 ,1 022(C-O);EI-MS m/e :(苷元)300(M-162+H),271,121;Mariner Mass (m/2) (M+624+1);(M+-162+H);;。13C-NMR: (见表1)。1H-NMR:(1H,s,5-OH), (2H,d,J=9 Hz,2′,6′-H,(2H, d,J=9 Hz, 3′,5′-H),(1H,d,J=1 Hz,8-H),(1H,d,J=1 Hz,6-H),(1H, d, J=7 Hz, glc1″-H),(1H,d,J=7 Hz,glc1″′-H),(3H, s,7-OCH3)。根据以上数据分析,与文献[2]报道的沙苑子苷A一致。见表1及图1~3。表1 沙苑子苷AC-NMR数据(略)
高效液相色谱检测:色谱柱VP-ODS(150 mm× mm,5 μm);分别以乙腈∶1%乙酸(22∶78),(16∶84),(14∶86)为流动相;流速:1 ml/min;柱温:40℃;检测波长:266 nm, mg/ml,进样量20 μl。结果表明,在3种流动相下对照品均为一个主峰,保留时间分别为:,