组织学与胚胎学实验指导.doc

组织学与胚胎学实验指导
主编吴岩
副主编任明姬崔明玉
编者(按姓名拼音为序)
吴岩任明姬崔明玉韩伊林陈阿梅赵若雷姜丽萍
内容提要
本书是根据普通高等教育“十五”国家级规划教材《组织学与胚胎学》(第六版)教科书所编写的实验教材,其中包括实验指导和模拟试题两部分。实验指导共26章,每章内容包含实验目的、重点和难点、实验内容、示教、作业、自测题、讨论题和思考题。书末附有模拟试题,供学生参考。
本书可供医药院校各专业《组织学与胚胎学》实验教学用。
前言
《组织学与胚胎学实验指导》是以全国普通高等教育“十五”国家级规划教材《组织学与胚胎学》(第六版)为根据,结合本院自编的组织学实验指导及多年实验教学的经验进行编写而成的。
本实验教材具有以下特点:
与《组织学与胚胎学》(第六版)教材密切配合。
书中列出的实验项目比较齐全,除要求学生观察的标本外,尚有若干数量的示教内容。
实验中设计有针对性地启发式提问,每章结尾还附有作业、自测题、讨论题和思考题。可以巩固所学知识并且提高学生的学习效率。
书末附有模拟试题,供学生课程结束后考察学有限,书中难免有不妥之处,敬请读者给予批评指正。
组织学绪论
一、实验目的
1、通过实验过程中的操作和观察来验证和巩固理论知识,加深学生对理论课内容的理解。
2、通过对各种组织切片的观察,逐步培养学生学会观察、比较、分析和综合各种现象的科学方法,培养学生独立思考和独立工作的能力。
3、进行本学科的基本技能训练,使学生能够熟练使用光学显微镜,了解组织和器官切片的一般制作过程,学会在光镜下正确绘图和描述观察到组织或器官的形态结构特点。
4、通过胚胎学实验课使学生能用生动的、变化发展的立体概念,了解胚胎各种组织、器官的发育和演变过程。
二、光学显微镜的构造、使用方法和保护
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(1)镜筒、物镜转换器、滤片槽、载物台、粗调焦手轮和细调焦手轮。
(2)照明器:是显微镜的灯光照明系统,直接组装在镜座内部。
(3)集光器:是一个装在载物台下可以沿着光轴方向垂直移动的透镜系统,它的主要作用时把照明光线聚集在被观察的物体上。
(4)光阑:在集光器上装有孔径光阑,它对物像的质量和分辨力的大小有着重要的作用。
(5)物镜:分低倍、高倍和油镜三种。低倍镜是4×和10×,高倍镜是40×,油镜是100×。
(6)目镜:常用放大倍数为10×的目镜,物像的放大倍数=目镜倍数×物镜倍数。目镜内有一黑色指针,可作指示镜下结构。
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取镜:拿显微镜时必须一手紧握镜臂,另一手平托镜座底,切忌单手提取以免目镜脱落。
放置组织切片:将组织切片的盖玻片朝上,放在载物台上,然后用标本夹固定。
调节焦距:从侧面观察低倍镜头,旋转粗调焦手轮使镜头接近玻片为止,从目镜观察,同时旋转细调焦手轮,边旋转边观察,直到视野物像清晰为止。
转换高倍镜:需转换高倍镜头时,必须先在低倍镜下将要观察的部分移到视野正中,然后直接转换高倍镜头,此时镜下隐隐约约可见物像,再稍微转动细调焦手轮即可看清楚物像。
(5)收尾工作:显微镜用毕,取下玻片,物镜转成“八”字形,下降镜头使之轻触载物台,最后将显微镜放入镜箱。
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(1)不能拆卸显微镜的任何部件或与其他显微镜调换部件,使用前后要检查各零部件是否齐全,如发现损坏应及时报告教师,以便修理。
(2)目镜、物镜和玻片要保持干净。
(3)不要随便用其它抹布或普通纸擦镜面。必要时可用擦镜纸,蘸少许二甲苯擦去镜头的污物。
三、组织切片的一般制作方法
一般需经过以下步骤:
:~,放入固定液固定6~24小时。固定的目的是使组织细胞在尚未发生死后显著变化之前,用固定液使细胞内的蛋白质凝固以保持组织原来的结构成分,提高细胞内微细结构的折光率以利于观察,但其形态结构与活的组织细胞有很大差异。
:因组织有水分不能与石蜡相混合,所以固定后的组织放在自来水中冲洗,把未与组织结合的多余固定液洗去,然后依次经浓度递增的乙醇,逐步除去组织内的水分。
:目的是使组织变硬易于切成薄片。其方法是把脱水后的组织块先经三次二甲苯除去酒精变透明,再经三次浸泡56℃的石蜡,使其充分渗入组织细胞内,最后把组织块包埋在石蜡中。
:用切片机切成5~10µm厚的蜡片,于温水中使蜡片张开,裱贴于涂有蛋白甘油的载玻片上,在温箱中烘干。
:目的是使细胞内各微细结构染上不同颜色,提高折光率以利于观察。常用苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)染色,简称HE染色。苏木素为碱性染料,使细胞内的某些物质如染色质和核糖体等染上蓝色