菌落总数检测.doc

菌落总数测定
录入时间:2006-6-26 16:28:16 来源:青岛海博生物

1 主题内容与适用范围
本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
2 术语
菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
3 引用标准
GB 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
4 设备和材料
温箱:36±1℃。
冰箱:0~4℃。
恒温水浴:46±1℃。
天平。
电炉
吸管。
广口瓶或三角瓶:容量为500mL。
玻璃珠:直径约5mm。
平皿:直径为90mm。
试管。
放大镜。
菌落计数器。
酒精灯。
均质器或乳钵。
试管架。
灭菌刀或剪子。
灭菌镊子。
5 培养基和试剂
营养琼脂培养基:按GB 。
磷酸盐缓冲稀释液:按GB 。
生理盐水。
75%乙醇。
6 检验程序
菌落总数的检验程序如下。
(图略)
7 操作步骤
检样稀释及培养
以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8000~10 000r/min的速度处理1min,做成1∶10的均匀稀释液。
用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1∶100的稀释液。
另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1mL火菌吸管。
根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照
待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。
菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
菌落计数的报告
平板菌落数的选择