遗传学实验-果蝇唾腺染色体.ppt

一、实验目的
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二、实验原理
双翅类昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大,其中的染色体称为唾腺染色体(salivary chromosome);
这种染色体比普通染色体大得多,宽约5μm,长约400μm,相当于普通染色体的100-150倍,因而又称为巨大染色体;
唾腺染色体经过多次复制而并不分开,大约有1000-4000根染色体丝的拷贝,所以又称多线染色体(polytene chromosome);
唾腺细胞中同源染色体互相靠拢呈现联会状态-体联会;
各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心(chromocenter);
唾腺染色体经染色后,出现深浅不同、密疏各别的横纹(band),其数目和位置是恒定的,代表着种的特征;
如果染色体有缺失、重复、倒位、易位等畸变,很容易在唾腺染色体上识别出来,因此唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料。
三、实验材料
黑腹果蝇的三龄幼虫
为了得到更好的染色体标本,需要在20—25℃和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行动迟缓、肥大,爬上管壁的三龄幼虫(化蛹之前)做标本最佳。
三龄幼虫照片
四、实验仪器与试剂
1. 器具: 双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。

2. 试剂: 改良苯酚品红溶液、生理盐水、1N盐酸。
五、实验步骤
实验前知识准备:
果蝇三龄幼虫的唾腺位于幼虫的头部附近,可以看看显微照片中的位置
(点击图片观察放大图)
实验开始

把载玻片置于双筒镜下。载玻片上滴加生理盐水1-2滴,取三龄幼虫放在其中,操作者两手各握一枚解剖针,左手的解剖针压住幼虫后端1/3处,固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫头部,用力向右拉,把头部从身体拉开,唾腺随之而出,唾腺是一对透明的棒状腺体。用针剔除脂肪组织。
图示
解离:
在载玻片上除去幼虫其它部分,用吸水纸吸去生理盐水,然后在腺体上加 1-2滴1NHCl溶液,作用5-10 min。
冲洗:
用吸水纸吸去HCl ,滴加蒸馏水于腺体上进行冲洗(两次)。
染色:
吸去蒸馏水,加1-2滴苯酚品红溶液,染色10min。
5. 压片观察:用镊子加盖玻片,压片。镜检。
六、实验结果
,找到好的染色体图像后,放到视野中心,再用高倍镜观察。
2. 黑腹果蝇染色体是2n=2×4=8(图一),但由于体细胞配对,又因短小的第4染色体和X染色体的着丝粒在端部,所以染色体的一端在染色中心上,看上去,各自只形成一条线状和点状染色体。只有第2和第3染色体的着丝粒在中央,它们从染色中心以V字形向外伸出(2L,2R,3L,3R),因此共有6条(图二)。
在显微镜下,短小的第4染色体有时不易观察到,所以最容易识别的是5条(图三)。
雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里,因为是异染色质,看起来染色可能深些。有经验的人可以发现雄果蝇的X染色体比雌果蝇X染色体要细些,因为雄性只有一条X染色体。