[硕士论文]组织工程技术构建兔尿道实验研究的初步探索.pdf

上海第二医科大学
博士学位论文
组织工程技术构建兔尿道实验研究的初步探索
姓名:傅强
申请学位级别:博士
专业:外科学(组织工程学)
指导教师:曹谊林
20050501
作者鉴名:盟醋期:俘鸡学位论文独创性声明学位论文使用授权声嚼剑,鹅駆矗遣苩·宅本人所曼交的学位论文是我在导蟠的撞导一械难芯抗し安2偷难芯成袋。爨我所鳃,羚文中已经注弼弓吹哪谌菟陖,本论文不包含其他个人已经发表交撰写过晌研究成巢。对零文的磷究锻出霪要贡献鳃个人襄集体,均已褒文中作了明麴滋明并表示谢意。本人完全了解上海第二二医科大学有关僳留、使用学位论文的飙定,学校有救保鼷学位论文并惫基容主骛部门蠛其揍定枫构送交论文的电予版年【街时帧有投将学位论文用于菲赢耐舀钓的少爨复制并允许论文进入学授图书馆被囊阕。商投姆学位论文魄肉容缀入有关数据摩进行检索。有权将学位论文麓标题霸撩要汇编出澈。僚密瀚学位论文在解密后遥用本焱定。学谊论文作者篓名日期
纵织工程技术构建兔尿道实验研究的初步探索中文摘要将通过分离培养的表皮细胞与脱细胞方法制备的膀胱粘髓下筋膜复合,修复缺损的艨邀,并与单缝的胶原修复效果进行比较,探索组织工程修复技术在尿道材料与方法霉昶け砥Υ啾7掷肱嘌图取雄性家兔包皮小块组织,酶消化成单细胞悬液,接种后静置培养、传代。莠定期露察绥魏形态交纯及生长罐筵渣况,兔疫缝纯染色,爨匏诗数及瓣缀魏耱虢鹣黢下簸貘骖复覆遂数实验磺究本研究将只雄兔作为实验对象,切取部分尿道的金周粘膜,以切取尿遴髂膜斡长发分以内耱陨削虸海靠案只将制备完成并消毒处理的同种家兔膀胱粘膜下脱细胞筋膜用可吸收线,缝合到联道缺损处,术后堋周分别处死~批实验对象,通过尿道造影,大体躐察,修复段缀缓切片染色光镜研究釉免疫缀诧等来研究修复段藤道的解剖和组织学燮化。0旮俅然苍亻锉砥袷╃院瞎菇ù瘫J笛榱拙用同种异体彝的膀胱,经显微外科分离和脱细胞液处理,制成无细腿豹生蘩支絮凭殃〕峒搅笆邓杷绮匦Т,只雄兔涎瓿努成实验窝对构建中的应用。舛ㄒ耘卸舷赴鲋衬芰Α基躬
漕讫收集分离出的表皮缨麓,经过增殖、传代培养到一定缡麓数量,植入生物支架中,培养埽⒓尤隑昙俏铮渚沓晒茏矗赴忝娉警憝,霞蘸入实验缝人工造成豹露遂袭簇;露对照缝翊鼙缝采用孟缀熬镶入的生物支架修复尿道;术前和术后、芊直鸩舛ㄖ瘟菩Ч每组各处死患彝茫朔,溉襄指标:簌遂造影、大体多巍⑿摅哦文虻啦谀ぐ緘冒け砥じ侔姆掷肱嘌壳┒分离消化后的表皮细胞生长良好,经免疫组化测定为正常表皮细胞,并传代Р厥看锏街踩肷镏Ъ懿⑸さ男枰!螂渍衬は峦严赴钅ぶ聘膀麓糕簇下羧霖缝织经麓缀藤滚楚瑾蘑,星蕊松懿薄膜获,夔橇激材染俄,光镜观察筋膜为疏松的胶原成分,无论是在上皮层还是在其下的真皮层,大部为续稳麓松瓣跤原纾缀,素燕有形褰龛整戆绥爨存在,少塞残存的细胞中也未见明鼹的细胞核存在,表明脱细胞效果良好,避免今后回植入体内时可能发生的舅体之滔的摊羚反应。旧允窘钅じ缓航Τ蓈;争严赴螂渍衬は陆钅ば薷茨虻赖氖笛檠芯榻鲆恢⑸蝠溆嗄虻涝煊跋允灸蜓辣就ǔ豪鯥组⑸琳无嚣瘘只/发生尿瘘,术后切取晌尿道组织标本大体观察,术后芰阶橹踩虢钅ひ廊淮嬖冢鹾周时,尿道檀入簿簇已簿察,致葱弁糜嗄赂炊纬绣逡讶ú勘凰拗黯紊硖擎魉照两绷,剥离实验对象ǚ殖ぁ秨臼尿道粘膜;实验组切取兔的小块包皮组织染色、免疫组化和荧光标记变化等。结鬃
术眉实验缀对象伤口愈合正常,排尿通畅,无尿瘘发生;修复尿道的大盏,粘膜光洁宪整,管腔无明显狭小;组的雄兔,修复段尿道中间苍角增厚,致密坚硬且管腔狭小。术后尿道修复段组织切片的染色显示:术后苄薷炊稳〔模阶槊嗜氲慕涸钅ひ廊淮嬖冢术后苄薷炊取材,两组植入的胶原筋膜己降解;组修复段上皮细胞层次较单缺乏乳头状精膜形态,粘膜下层和肌层已修复,嫠底细胞和平潜胍缁脆形态与腐遗孤常细隰无骥箍差异,瓿层中的盘管中有帮分充斑;缀酶糨膜下菇存在较多程太紊琵鼹平谤魏瓢寒,剞蓬为擎藩主发绥憨覆盏,裘嚣鹜凸不平;私堑發皇疉拣髂显示瑟缀修复段最邀鹭为上皮鲴憝嚣覆蕊。嫌然势锰寤砥びО岷舷鸾ㄟУ赖氖笛檠芯体形态和尿道造影显示,任何观察点带细胞修复的尿道形态完艇,清晰宽敞无狭窄发生;骶和免疫组化显示,术后拢薷炊昔康勒衬げ愦蔚ヒ唬缺乏复屡和乳头结构。术后赂床闵掀そ峁剐纬桑堑鞍兹旧粜浴J踔抡衬じ床恪皮结构更为丰富,角蛋白染色阳性:标记在术后虑晰显示植入上皮细胞滕存在,术后蠦派ǖ谋砥は赴跎伲叶囔中与基藤层。术后履蛞T隳ば髑v街形疵釨排茫涣蕉哉辗焓笛槎韵粥高王羹撵尿变缁,藤遂造影羧示;经簿鼹察露袋,均毯凌深遴狭窄;丈薅鼹察:不嬲麓察点穆复投尿遴均窭联挛缩,结骥惑憾不平。穆复段缎织切片提示术螽陆鲆岬ヒ簧掀は告醪愦嬖冢谀は麓嬖诖罅看执蟮募”谩术后潞月有复层细胞的移行上皮细胞形成,但粘膜下仍为粗大的肌束存在;免疫组化提示任何观察点,修复段尿