免疫微粒技术.ppt

免疫微粒
主讲:李建永
组长:苏冠
组员:贺小玉马少帅庞静刘红艳王玉红李一平张彭方高丽芳
定义
免疫微粒技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的固相微粒为载体,包被上具有特异性亲和力的各种免疫活性物质(抗原、抗体或配体),使其致敏为免疫颗粒,用于免疫学和其它生物学检测与分离的一项技术。
常用载体
作为载体的微粒通常为惰性微粒。如聚苯乙烯胶乳微粒、羧化聚苯乙烯微粒、磁化微粒、脂质体微粒和标记微粒(核素、荧光素或酶标记)。
将制备好的微粒与抗原(或抗体)经物理吸附、化学偶联及生物素-亲和素桥联法等质敏方法形成免疫微粒。广泛应用于各种可溶性大分子的检测、分离和纯化、细胞标记与识别等。
1:乳胶微粒免疫检测技术
原理:乳胶凝集实验的原理与间接凝集实验相同,将可溶性抗原(或抗体)致敏乳胶微粒,形成的免疫乳胶(immunolatex)可与相应的抗体(或抗原)结合,发生特异性凝集反应。
2:乳胶免疫测定法
原理:胶乳微粒免疫检测技术是在胶乳凝集定性试验基础上发展建立的-种非放射性均相免疫测定法,可以对各种微量的抗原物质和小分子半抗原(加药物、团体激素等)进行精确的定量测定。
根据特异性抗体致敏的胶乳微粒(一般为直径约1μm的聚苯乙烯胶乳),与待测标本中的相应抗原相遇时发生凝集反应,胶乳凝集程度与被测物的浓度呈函数关系,由此可测出标本中待测物的含量。测定方法主要有粒子计数法和浊度法两种。

原理:磁性微粒(ic microspheres, MMS) 是80年代初,用高分子材料和金属离子为原料,聚合而成的一种以金属离子为核心,外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒。
在液相中,受外加磁场的吸引作用,MMS可快速沉降而自行分离,无需进行离心沉淀。因此,将MMS应用于免疫检测,可使操作过程大为简化。经过特异性抗体包被制成免疫MMS,与检样中的抗原结合形成免疫MMS-靶分子(或靶细胞)复合体,通过外加磁场的作用即可与其他成分分离开来。再以适当方式使复合体解离,在磁场吸引下除去游离的免疫MMS,即可获得纯化的靶分子或细胞。