环加氧酶在碱性成纤维细胞生长因子引起小鼠脑微血管内皮细胞增殖中的作用和意义.pdf

复旦大学
硕士学位论文
环加氧酶在碱性成纤维细胞生长因子引起小鼠脑微血管内皮细
胞增殖中的作用和意义
姓名:乐飞
申请学位级别:硕士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:金惠铭
20040521
环加氧酶在碱性成纤维细胞生长因子引起小鼠脑微血管内皮细胞增殖中的作用和意义撬陷┧妒垦芯可宦畚摘要血管新生是血管内皮细胞特别是微血管内皮细胞在原有血管的基础上通过增殖、迁移及分化等一系列复杂的生物学反应而形成新血管网的过程。血管新生的机制至今尚未阐明。体外细胞培养株,经我们鉴定和研究,.膙蜃觟纫灿胁煌潭鹊谋泶铮淮嬖诠芮谎峁以及毛细血管样网络:是~种促血管新生因子,对血管新生多个环节都有直接或间接作用,能明显引起多种的增殖,以前的研究认为的这一作用主要是通过结合细胞膜芴搴笸ü幌盗械男藕抛5纪揪痘罨胞周期蛋白而完成的。近几年的一些研究发现环加氧酶斡隻鸬血管新生,以此为线索,本文研究了赽鸬腗鲋持械淖饔及动态变化,同时也进~步深入研究了对分泌和的研究结果发现:、、等具有促血管新生随着浓度痬升高而增强,./詁和蛋白质袭达影响存在明显的时间和剂量相关性:;到高峰,随后逐渐减弱;及蛋白表达水平随浓度,本研究所用鞘章荚贏细胞表面有丰富微绒毛,所以是一种。增殖是血管新生中一个十分重要的环节,碱性成纤维细胞生长因子本文主要使用:高通量血管新生基因芯片检测、匝椤狿、、免疫细胞化学染色、妊芯糠椒ā蝝作用作用的基因表达明显上调,,同时、、猵瓤寡9苄律饔玫幕蛞裁飨陨系鳌赴鲋芤种芺鸬腷鲋场对正常培养增殖没有影响。诩纯晒璴起鞍妆泶镌銮浚痬:升高而增强,表达不受影响。/饔胋分泌即明显增加,锏礁叻澹婧蠼档停籔置诹克鎎痬桓阳性;、影响及意义。后一、驪
岫、能抑制引起的分泌增加。棋现克妒垦欣郎宦畚骎置诿飨栽黾樱达到高峰,随后降低;.饔骎置诿飨栽黾樱珹曲苻卓筆鸬腣综合以上实验结果:①在血管新生早期能上调促血管新生基因表达而下调抗血管新生基因表达;③对③在引起的鲋持衅鹬匾W饔茫虎躡ü系鰿一⑤通过促进分泌。基于上述结果我们得出结论:,从而促进血管新生;进增殖;通过上调泶铮琤姆翘匾煨源傧赴鲋匙关键词:碱性成纤维细胞生长因子;微血管内皮细胞;血管新生;血管内皮生长因子;浓度升高而增加,一芤种芺鸬腜置谠黾印/ü篵用转化为的特异性促增殖作用。细胞增殖;前列腺素;分类号:环加氧酶基因芯片;分泌增加。.
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—牛血清白蛋白.Ⅱ’
,血管新生便是其中之一。血管新生是在生理或病理情况下,在原有的毛细血管与/或微静脉基础上通过微血管内皮细胞增殖和迁移,从先前存在的血管处以芽生或非芽生的形式生成新的毛细血管的过程。血管新生启动后,首先与血管周细胞解离,蛋白水解酶降解细胞外基质蝗缓螅琈⑸ㄒ啤⒃鲋场分化并形成管腔样结构詈螅琈胙9苤芟赴匦伦楹希珽发生重塑,形成有功能的毛细血管网【俊血管新生与许多生理和病理过程密切相关:前者如子宫内膜周期性脱落、创伤修复和愈合;后者如肿瘤的发生、发展、转移,类风湿性关节炎,糖尿病性视网膜病等。虽然来源于大血管的与来源于微循环的在细胞学特征和生物学功能上有一些共同点,但它们之间也存在明显差别。是血管新生的主角,正因为如此,许多重大疾病发病机制以及干预措施的研究有时需要用相应组织来源的;所以,的培养与研究在血管新生的基础和临床研虽然国内外已经成功建立了人以及常见实验动物不同组织来源的分离和培养方法,但是由于原代培养时遇到的技术和经费困难,许多分离和培养方法在国内实验室中很难成功复制。原代培养在国内仍然十分局限,所以运用公认、稳定的细胞株仍然是国内学者进行有关研究的国内血管内皮细胞株种类十分有限,有些细胞株还因为被怀疑受肿瘤细胞污染而使其受到质疑,这种状况对推动我国血管新生研究十分不利。.敲拦章嫉囊恢中∈竽宰橹丛吹难9苣皮细胞株,但其究竟是来源于大血管还是微血管,国内外还未定论。本文从细胞形态学、细胞表面分子标记,细胞分泌物等方面对究中有着十分重要的