沙田柚指纹图谱特征与其药效学关系的分析.docx

沙田柚指纹图谱特征与其药效学关系的研究
沙田柚指纹图谱特征与其药效学关系的研究
博士研究生:苏薇薇指导教师:吴曙光教授
摘要
随着现代分析技术的不断进步及对中药系统研究的不断深入,中药指纹图谱质量控制技术应运而生。所谓指纹图谱是指某种中药经过适当的处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标志该中药特征的色谱图。指纹图谱已成为当前中药质量研究的一个热点,在国内呈燎原之势,在国外也广泛得到认可。但是,我们必须清醒地认识到:目前的指纹图谱研究还存在明显的不足和严重的缺陷,即存在着指纹图谱与药效相脱节的问题。这有悖于指纹图谱研究的初衷, 限制了指纹图谱的发展和应用。指纹图谱反映出的信息必须与药效相对应,或者说必须与药效有高度的关联性,这正是本论文所要思考和解决的问题。
本论文以芸香科柑桔属植物沙田柚Oitrus grandis(L.)Osbeck vat. sflatinyu ,构建了沙田柚的指纹图谱,并进行止咳、化痰的药效学试验,获得指纹图谱的量化特征和药效学数据。在此基础上,用灰关联度分析方法,寻找沙田柚谱效之间的对应关系。本论文取得如下几方面的成果: |柚指纹图谱的构建及模式分类研究:
,对色潜条件(包括流动相、洗脱梯度、色谱柱、检测波氏等)进行了优化,完成了系统的方法学考察, 构建了沙}爿柚IIPLC指纹图谱。应用“中药色谱指纹图谱计算机辅助相似性评价系统软件”对沙田柚HPLC指纹图谱进行了相似度评价。用系统聚类分析法对量
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第一军医大学博士学位论文化的指纹特征(色谱峰峰面积)进行了计算机聚类分析;建立了典则判别函数和Fisher’S判别函数,结果与实际完全相符,说明本法极为可靠。在实际应用时,只需将待测样品按本研究所述色谱条件进行分析,将量化指纹特征输入计算机进行运算,就能快速得出分类结果。本研究具有理论意义和实用价值。 :
采用气相色谱质谱(GC—MS)联用技术分析了沙田柚幼果挥发油成分,其主要成分有:香芹酚、D一柠檬烯、B一石竹烯、n一佛手柑烯、B一月桂烯、n一石竹烯、奴卡酮等,这为开发和利用沙田柚药用资源提供了一定依据。
采用多次硅胶柱层析法进行分离纯化,从沙田柚中分离得到3个7一甲氧基香豆素,分别鉴定为橙皮内酯水合物、pranferin和异橙皮内酯。其中:橙皮内酯水合物和异橙皮内酯系首次从沙田柚幼果中分离得到,而pranferin则是橙皮内酯水合物的缩酮衍生物。
: 在获得沙田柚指纹图谱与药效学量化数据的基础上,采用灰关联度分析技
术,寻找指纹图谱特征所代表的化学成分对药效贡献的大小。结果表明:沙田柚的止咳化痰作用是其内“化学成分群”共同作用的结果。依据关联度的大小, 确定各成分对“止咳作用”贡献的大小顺序为:柚皮苷>橙皮内酯水合物>香柑内酯>佛手柑亭>异橙皮内酯>柚皮素>新橙皮苷>野漆树苷。而各成分对“化痰作用”贡献的大小顺序为:野漆树苷>新橙皮苷>柚皮苷>香柑内酯> 橙皮内酯水合物>柚皮素>异橙皮内酯>佛手柑亨。
本研究建立了一种全新的能够使谱效关系相对应和相统一的质量控制模式,在中药指纹谱效定量关系研究上填补了国内在这一领域的空白。本研究具有理沦意义和实用价值,同时对指纹图谱在中药产业的应用起到了示范作用。
关键词
沙田柚指纹图谱药效学聚类分析狄关联度分析
沙田柚指纹图谱特征与其药效学关系的研究
Study on correlat ion between characteri st ic of
Shatianyou fingerprint and pharmacodynamics
Name:Su Weiwei
Superv i sor: Shuguang
ABSTRACT
With the increasing development of modem analytical techniques,fmgerprint of Chinese Traditional Medicine(TCM)e into SO-called fingerprint rears to certain TCM are treated properly,and application of some analytical methods to obtain characteristic,which can represent the fingerprint have ing more and more hot in research of TCM quality and been widely r