摘要: 淀粉是葡萄糖以α-1,4 糖苷键及α-1 , 6 糖苷键连结的高分子多糖,是人类和动物的重要食物,也是食品、发酵、酿造、医药、纺织工业的基本原料.
四、操作步骤
1、酶液提取
称取 2g 萌发 3 天的小麦种子(芽长 1cm 左右),置研钵中加少量石英砂和 2m1 左右蒸馏水,研成匀浆,无损地转入 100m1 容量瓶中,用蒸馏水定容至 100m1 ,每隔数分钟振荡 1 次,提取 20min . 3000r / min 离心 l0min ,转出上清液备用.
2、a- 淀粉酶活力测定
(1) 取试管 4 支,标明 2 支为对照管, 2 支为测定管.
(2) 于每管中各加酶液 l ml ,在 70 ℃士 ℃恒温水浴中准确加热 15min ,钝化β- .
(3) 在对照管中加入 4 m1 / L 氢氧化钠.
(4) 在 4 支试管中各加入 1ml 的柠檬酸缓冲液.
(5) 将 4 支试管置另一个 40 ℃士 ℃恒温水浴中保温 15min ,再向各管分别加入 40 ℃下预热的 1 %淀粉溶液 2m1 ,摇匀,立即放入 40 ℃恒温水浴准确计时保温 5min .取出后向测定管迅速加入 4 ml 0. 4mol/ L 氢氧化钠,终止酶活动,准备测糖.
3、淀粉酶总活力测定
取酶液 5ml ,用蒸馏水稀释至 100m1 , 4 支试管编号, 2 支为对照, 2 lml .在对照管中加入 4m1 氢氧化钠. 4 支试管中各加 1 ml pH5. 6 - 淀粉酶测定第( 5 )步的操作,同样准备测糖.
4、麦芽糖的测定
(1)标准曲线的制作
取 25ml 刻度试管 7 支,( lmg/ml ) 0, , , , , , ml ,然后用吸管向各管加蒸馏水使溶液达 ,再各加 3 , 5 一二硝基水杨酸试剂 ,置沸水浴中加热 5min .取出冷却,用蒸馏水稀释至 25
m1 .混匀后用分光光度
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