透明质酸钠细菌内毒素检测.doc

透明质酸钠细菌内毒素检测
李国凤刘丽赵长美石滨于洪英
透明质酸钠(HA),在医药领域已有广泛应用。药用透明质酸钠用于配制注射剂时,必须检查内毒素,以保证用药安全。本文通过实验摸索透明质酸钠对检查的无干扰浓度,以确立适宜的检测方法并进行样品的检测。
1 实验仪器及材料
天平、电热干燥箱、恒温水浴箱、温度计、旋涡混合器、细菌内毒素检查用具一套(吸管、具塞试管、容量瓶等),180℃,2hr除热原。
透明质酸钠(HA):山东福瑞达生物化工有限公司产品,批号:20011016、20011101、20011112、20011022、20020415、20020416。
鲎试剂(TAL):湛江安度斯生物有限公司,批号:0109142 λ=。
内毒素工作标准品(WSE):中国药品生物制品检定所,批号:2000-4,120单位/支。
细菌内毒素检查用水:湛江安度斯生物有限公司,批号:0109070 2ml/支,批号:0110190 5ml /支,内毒素含量:<。
2 方法与结果
鲎试剂标示灵敏度(λb)复核
按照中国药典2000年版二部附录Ⅺ E方法,实验结果如下:
表1 鲎试剂标示灵敏度(λ)复核
TAL
批号
(λb)
Eu/ml
内毒素浓度(Eu/ml)
NC
λC(Eu/ml
)




0109142

++++
+++ -
- - -
- - - -
- -

λC=lg-1(∑X/4)
λC=lg-1[(+++)/4]= Eu/ml
~,符合规定。
干扰试验
从欧洲药典查得,。样品稀释成1mg/ml备用。
根据以下公式计算最大有效稀释倍数:
MVD=CL/λ=1mg/ml×/ ml=4倍
故对1mg/ml备用样品进行4倍稀释,。、、、。按中国药典2000年版二部附录Ⅺ E方法进行干扰试验。用细菌内毒素检查用水制成的内毒素溶液为标准对照,NC、NPC分别为阴性对照和供试品溶液阴性对照。干扰试验结果如下:
表2 干扰试验结果
样品及批号

()()()()
NPC
NC
反应终点
浓度Eu/ml
标准对照
1
+
+
-
-
-
-

-
-



2
+
+
-
-
3
+
+
+
-
4
+
+
+
-
供试品阳性对照HA
20011016
1
+
+
+
-
-
-
-
-




2
+
-
-
-
3
+
+
-
-
4
+
-
-