3血凝及血凝抑制试验.doc

二О一三年三月专业技术考试
(血凝及血凝抑制试验)
姓名: 成绩:
填空题:(5分/空,共计75分)
检测禽流感抗体,目前在用的检测依据的标准名称为:《高致病性禽流感诊断技术》,其编号(含年号)为: GB/T 18936-2003 。
检测新城疫抗体,目前在用的检测依据的标准名称为:《新城疫诊断技术》,其编号(含年号)为: GB/T16550-2008 。
新城疫抗体检测中,血凝试验所用的磷酸盐缓冲液(PBS)所需pH值为 。
国标《新城疫诊断技术》:b),吹打 3 次~ 5 次充分混匀;
国标《新城疫诊断技术》:a)在PBS对照孔出现正确结果的情况下,将反应板倾斜,观察红细胞是否完全凝集。以完全凝集的病毒最大稀释度为该抗原的血凝滴度。
国标《新城疫诊断技术》)%红细胞悬液,轻晃混匀后,室温(约 20 ℃~ 25℃)静置约 40 min,若环境温度太高,放4℃静置 60 min。当PBS对照孔红细胞呈明显纽扣状沉到孔底时判定结果。
国标《新城疫诊断技术》)在PBS对照孔出现正确结果的情况下,将反应板倾斜,从背侧观察,看红细胞是否呈泪珠状流下。滴度是指产生完全不凝集(红细胞完全流下)的最高稀释度。只有当阴性血清与标准抗原对照的HI滴度不大于 2log2 ,阳性血清与标准抗原对照的HI滴度与已知滴度相差在 1 个稀释度范围内,并且所有阴、阳性血清都不发生自凝的情况下,HI试验结果方判定有效。
二、请简单描述检测新城疫抗体用1%鸡红细胞悬液(RBC)制备方法(25分)
采集①至少三只SPF公鸡或无禽流感和新城疫抗体的非免疫鸡的抗凝血液,放入离心管中,②以2000r/min离心5min-10min,去掉血浆和白细胞层,重复以上过程,③反复洗涤三次(洗净血浆和白细胞),④最后吸取压积红细胞用PBS配成体积分数为1%的悬液,⑤于4℃保存备用。