人免疫球蛋白G酶解制备Fab和Fc片段及其分离纯化.pdf

!第!"卷!第#期! !化!工!学!报!!! !!!!$%&'!"!(%'#
! )*+,年#月! !-./0-!1%2345&! !!657!)*+,
"
"# """"#
"
"
#
" " " "
研究论文"
#
" 人免疫球蛋白! 酶解制备"#$和"%片段
及其分离纯化
唐思远!林东强!童红飞!姚善泾
!化学工程联合国家重点实验室"浙江大学化学工程与生物工程学系"浙江杭州,+**)8#
摘要$为了制备抗体 95:和 9;片段"采用木瓜蛋白酶酶解人免疫球蛋白< !.=<#"通过优化酶解条件和色谱法
分离过程"得到了纯度较高的 95:片段和 9;片段%考察了酶解>?&酶加入量&添加半胱氨酸和酶解时间等对
.=< 酶解过程的影响"优化了酶解条件"提高酶解效率".=< 转化率大于***@AB%酶解产物通过 C3%DEF4G 亲和色
谱法和 H/G/阴离子交换色谱法进行了纯化"分离得到 9;片段和 95:片段"收率分别为 8)'!B和"*'+B%经
0/-I?CJ-分析"9;片段纯度达@#'8B"95:片段纯度达@!'!B%
关键词$人免疫球蛋白<'9;片段'95:片段'木瓜蛋白酶'亲和色谱法'离子交换色谱法
&'($+*',@!@(K'FLL4'*",AI++#8')*+,'*#'*,"
中图分类号$MN*)A!!!!!!!文献标志码$G 文章编号$*",AO++#8 !)*+,#*#O+8#*O*8
)*+,#*#-./0#012+,#*#-./0/3"#$#01"%3*#45+0-23*/5675#0
.5570/48/$!9.-6,#,#.+2-./0
:;<!=.>7#0!?(<&/******@.#04!:'<! A/043+.!B;'=6#
!!"#"$%$&'#()*#")*&)+,-$./0#1234/3$$*/34"5$6#*".$3")+,-$./0#1#378/)1)4/0#1234/3$$*/34"9-$:/#34
;3/<$*=/"&">#34?-)@,+**)8"9-$:/#34",-/3##
;$2-*#%-$9%3DPE>3E>535DF%4 %Q95:54R 9;Q35=SE4DL TFDP PF=P >23FD7"P2S54FSS24%=&%:2&F4 <
!P.=<#T5LD3E5DER TFDP>5>5F454RFDL>23FQF;5DF%4 TFDP;P3%S5D%=35>PF;DE;P4FU2ELT5LEV>&%3ER'MPE
;%4;E4D35DF%4%Q;7LDEF4">5>5F45RRFDF%4">? 54RF4;2:5DF%4DFSETE3E%>DFSFWERD%FS>3%XERF=ELDF%4
EQQF;FE4;7TFDP >5>5F4"54R;%4XE3LF%4 %Q.=< ;%2&R3E5;P S%3EDP54 ***@AB'MPE4 C3%DEF4 G 5QQF4FD7
;P3%S5D%=35>P754R H/G/ 54F%4IEV;P54=E ;P3%S5D%=35>P7 TE3E 2LER D% LE>535DEDPE 95: 54R 9;
Q35=SE4DLQ3%S