实验-血糖测定(葡萄糖氧化酶法).doc实验血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
【目的】
体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】
葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时,还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于:糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于:胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】
样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】
紫外分光光度计,恒温水浴箱,移液器(枪),枪头,试管
【药品】
葡萄糖测定试剂盒,试剂盒主要成分与浓度:
试剂
主要成分
实验浓度
R1
葡萄糖氧化酶(GOD)
过氧化物酶(POD)
≥13000U/L
≥900U/L
R2
磷酸缓冲液()
酚
4-氨基安替吡啉
100mmol/L
11mmol/L
葡萄糖标准液 (100mg/dl)
【样本】
新鲜无溶血血清。
【步骤】
将10ml R1与90ml R2混合均匀,即为工作液。
空白管
校准管
样品管
工作液
ml
ml
ml
蒸馏水
ml
——
——
校准液
——
ml
——
样品
——
——
ml
分别混合均匀,37℃水浴10~15分钟(避免太阳光直射),用波长505nm、,用空白管调“零”点测定各管的吸光度(A)值。
【计算
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