实验一蛋白质的两性电离和等电点的测定【目的】验证蛋白质的两性电离与等电点性质。【原理】蛋白质由氨基酸组成。蛋白质分子除两端游离的氨基和羧基可解离外,其侧链上的某些酸性基团或碱性基团,在一定的溶液pH条件下,都可解离成带负电荷或带正电荷的基团。因此,蛋白质具有两性解离性质。当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势相等,既净电荷为零,成为兼性离子,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点(isoelectricpoint,pI)。蛋白质在等电点状态时溶解度最低,容易沉淀析出。蛋白质在大于其等电点的pH值溶液中带负电荷;在小于其等电点的pH值溶液中则带正电荷。蛋白质在等点电以外的pH值溶液中,因分子带有同种电荷而相互排斥,不易沉淀。本实验通过观察酪蛋白在不同pH溶液中的溶解度来测定其等电点。蛋白质解离成阳离子蛋白质成兼性离子蛋白质解离成阴离子【操作】,按以下步骤加入各种试剂,观察现象变化并记录。步骤现象(1)5g/L酪蛋白醋酸钠溶液1ml,~7滴,混匀后,观察并记录溶液的颜色。(2),边滴边摇,直至产生明显的大量沉淀,观察并记录沉淀与溶液颜色的变化。(3),观察并记录沉淀与溶液颜色的变化。(4),边滴边摇,使之再度产生明显的大量沉淀,,沉淀又溶解,观察并记录溶液颜色变化。,编号后按下表的顺序准确地加入各种试剂并混匀。静置室温20分钟后观察各管沉
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