环境中微生物的检测与分离纯化实验报告.doc

环境中微生物的检测和分离纯化
实验原理

土壤中含有丰富的微生物,可以从中分离纯化得到很多有价值的菌株。
微生物常用的分离方法是平板分离法,根据某种微生物对生长条件的不同要求供给它适宜的培养环境,再用稀释涂布平板法或稀释后平板划线分离,纯化该微生物,直到得到纯菌株。

将待测样品经适当稀释后,其中微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中含的菌落数。
实验材料与试剂
土壤稀释溶液
取液器(1000ml 1支),培养箱,培养皿(12个),无菌有帽试管,三角瓶,无菌涂棒,接种环,1000ml无菌吸头若干,记号笔,酒精灯,火柴,试管架。
实验步骤
(一).无菌平板制备
采用叠皿法把牛肉冻蛋白膏培养基倒入灭好菌的培养皿中,制作无菌平板
(二).周围环境中微生物的检测
取一平板,分成6个区,做好标记。同一个人同一根手指头按如下要求用力一致进行操作:分别用未洗过的手指头,自来水打湿的手指头,自来水认真洗过的手指头,洗手液洗过一遍的手指头,洗过两遍的,洗手液洗过又用酒精棉球消毒后的手指头在六个区上涂抹。(平板1)
取一平板,分区,分别用使用过的纸巾,硬币,旧纸币,餐卡在不同区拖动。(平板2)
在培养基上方抖动头发数次。(平板3)
取一平板,分区,用无菌接种环分别蘸一滴自来水,河水,豆浆在不同区划线。(平板4)
用无菌牙签取一点牙垢在培养基上划线。(平板5)
取两个平板,一个打开在实验台上放置30分钟,另一个在酒精灯火焰边打开皿盖1分钟。(平板6)
取一平板,打开盖,咳几下。(平板7)
(三).从土壤中分离微生物



吸取100ml稀释好的土壤稀溶液,较均匀地滴在平板上,再用无菌涂棒涂布均匀,涂1—2分钟

将培养基平板倒置于37℃下培养24小时


:从未洗到用酒精消毒总体趋势是菌落数越来越少,用自来水洗过和用洗手液洗过一遍的菌落数差不多;
平板2:旧纸币和硬币的菌落数要多;
平板3:抖头发的地方附近长出许多菌落;
平板4:自来水菌落最多,其次是河水,河水的菌落分布成“牛”字形,和当时划线的形状一样,再其次是豆浆;
平板5:划线的地方长出许多菌落;
平板6:放在试验台上的平板长出各种形状