生物化学试验教学大纲-湖北大学生命科学学院.doc

湖北大学
生物化学实验
(课程代码)
实验教学大纲
(第2版)
生命科学学院
生化教研室
2010年7月
前言
课程名称:生物化学实验学时:64
适用专业:生物科学、生物技术、生物工程课程性质:必修
实验课程简介
生物化学实验课程是生命科学本科实验教学的一个重要组成部分,实验性质有基础性、综合性、设计(创新)性三层次,实验项目数共25个,按照学时要求完成必做与选做实验。在实验过程中要求学生自己动手,独立观察并完成实验报告,注重培养学生创新思维与能力。
二、课程目的
通过实验教学可以加强学生对生物化学基本知识和基本理论的理解,掌握现代生物科学与技术的实验原理与技能;同时,通过实验培养学生独立观察、思考和分析问题、解决问题和提出问题的能力,养成实事求是、严肃认真的科学态度,提高学生的科学素养以及敢于创新的开拓精神。
三、考核方式及成绩评定标准
生物化学实验课程考核采用笔试与操作能力二种方式;
期末成绩评定标准为:平时成绩60%;笔试10%;操作能力30% 。
四、实验指导书及主要参考书
陈均辉等,《生物化学实验》科学出版社,2003年4月第三版
蒋立科等,《生物化学实验设计与实践》高等教育出版社, 2007年10月第1版
五、实验项目
实验项目一览表
序号
实验项目名称
实验类型
实验学时
必做/选做
实验一
蛋白质及氨基酸的呈色反应与甲醛滴定法测定氨基氮
验证性
3
必做
实验二
氨基酸的分离鉴定――纸层析法
验证性
3
必做
实验三
醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白
验证性
3
必做
实验四
双缩脲法测定蛋白质浓度
验证性
3
必做
实验五
酪蛋白的制备与定量测定
综合性
4
必做
实验六
影响酶促反应的因素
验证性
3
必做
实验七
枯草杆菌蛋白酶活力的测定
验证性
3
必做
实验八
米氏常数的测定
验证性
3
选做
实验九
维生素C的定量测定
验证性
3
必做
实验十
核黄素的荧光光度定量测定
验证性
3
必做
实验十一
植物组织中蔗糖酶的提取与酶活力测定
综合性
5
选做
实验十二
紫外分光光度法测定核酸含量
验证性
3
选做
实验十三
腺苷三磷酸的测定(电泳法)
验证性
3
选做
实验十四
酵母核糖核酸的提取、鉴定与定量分析
综合性
5
必做
实验十五
糖的旋光性和变旋现象
验证性
3
必做
实验十六
还原糖的测定—3,5-二硝基水杨酸法
验证性
3
必做
实验十七
脂肪酸的β—氧化作用
验证性
3
必做
实验十八
大豆中粗脂肪含量测定和组分分析
综合性
5
选做
实验十九
卵磷脂的提取、鉴定与定量测定
综合性
5
必做
实验二十
阳离子交换树脂摄取氯化钠
验证性
3
必做
实验二十一
离子交换柱层析法分离氨基酸
综合性
4
必做
实验二十二
发酵过程中无机磷的利用
综合性
4
必做
实验二十三
乳酸脱氢酶活力测定
综合性
4
选做
实验二十四
凝胶过滤法测定蛋白质分子量
综合性
4
选做
实验二十五
脂蛋白的分离与鉴定—琼脂糖电泳
综合性
4
选做
合计
64
实验类型:演示性、验证性、综合性、设计性、其它
实验一蛋白质及氨基酸呈色反应与甲醛滴定法测定氨基氮(3课时)
实验类型:验证性
实验目的:
学习几种常用的鉴定蛋白质与氨基酸的方法,掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点。
实验内容:
1、茚三酮反应:
(1)取两支试管分别加入蛋白质和氨基酸溶液1ml,%茚三酮水溶液,混匀,沸水浴加热1-2min,观察颜色由粉色变紫红再变蓝。
(2)%Gly溶液,风干后,%的印三酮乙醇溶液,在微火旁烘干显色,观察紫红斑点的出现。
2、黄色反应:
向7个试管中分别按下表加入试剂,观察各管出现的现象,有的试管反应慢可略放置或用微火加热。待各管出现黄色后,于室温下逐滴加入10%氢氧化钠溶液至碱性,观察颜色变化。
管号
1
2
3
4
5
6
7
材料
(滴)
鸡蛋清
溶液4
大豆
提取液4
指甲
少许
头发
少许
%
苯酚4
%
色氨酸4
%
酪氨酸4
浓硝酸(滴)
2
4
40
40
4
4
4
3、甲醛滴定
(1)标准Gly溶液的滴定。
(2)计算:
Gly氨基氮的回收率%=实际测得量∕加入理论值×100%
4、未知浓度Gly溶液的滴定
氨