高效液相色谱法测定依达拉奉注射液中依达拉奉及有关物质的含量.doc

高效液相色谱法测定依达拉奉注射液中依达拉奉及有关物质的含量
[摘要] 目的建立测定依达拉奉注射液中依达拉奉及有关物质含量的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用Cromasil C18柱(250 mm× mm,5 μm),流动相:甲醇- mol/L磷酸二氢铵溶液(50:50)[用20%磷酸调节pH值至(±)];流速: ml/min;检测波长:239 nm;柱温:30℃。结果在该色谱条件下,依达拉奉与样品中杂质可完全分离;~ μg/ml 范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r = ,n = 5),%(RSD = %,n = 9), ng。结论本法操作简便快速,准确可靠,专属性强,可用于依达拉奉注射液中依达拉奉及有关物质的测定。
[关键词] 依达拉奉;HPLC;含量测定;有关物质
[中图分类号] [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)07(c)-0061-04
依达拉奉(edaravone,3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)为强效自由基清除剂,于2001年在日本上市,临床上主要用于治疗急性缺血性脑卒中[1]。作为第1个新型氧自由基清除剂,具有清除自由基、抑制脂质过氧化及减轻缺血脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化和再灌注损伤的作用,并可阻止脑水肿和脑梗死进展,改善因急性脑梗死所致的神经症状、日常生活活动能力和功能障碍[2]。近年来,有关依达拉奉治疗肌萎缩侧索硬化症、帕金森病等的临床研究正在进行中,抗癫痫和抗类风湿性关节炎在临床实践中被发现,其对人类多种疾病的有效性说明此药具有广阔的开发前景[3]。本研究根据依达拉奉的结构特点和化学性质,参考相关文献[4-7],建立了高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定依达拉奉注射液中依达拉奉及有关物质的含量,本方法能将供试品中主峰与有关物质峰完全分离,且能有效检出依达拉奉注射液中所含杂质,具有专属性强、灵敏度高、选择性好、简便、准确等特点,可有效地应用于依达拉奉注射液的质量控制。
1 仪器与试药
仪器
岛津LC-15C高效液相色谱仪,SPD-15C紫外-可见光检测器(日本岛津公司),CTO-15C色谱柱柱温箱(日本岛津公司),Lcsolution 15C 工作站(日本岛津公司),SIL-10AF自动进样器(日本岛津公司);UV-2450紫外分光光度计(日本岛津公司)、AUW120D 岛津分析天平。
试药
甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯。依达拉奉对照品(批号:100620-200401;含量100%,中国药品生物制品检定所);依达拉奉注射液(福寿堂制药有限公司;规格:20 ml∶30 mg;批号:110911、110913、110915)。
2 方法与结果
色谱条件和系统适用性试验
色谱柱:Cromasil C18柱(250 mm× mm,5 μm);流动相:甲醇- mol/L磷酸二氢铵溶液(50
∶50)[用20%磷酸调节pH值至(±)]; ml/min;检测波长:239 nm