第四节 菌种退化、复壮与保藏课件.ppt

第四节 菌种退化、复壮与保藏课件.ppt第四节菌种退化、复壮与保藏在生物进化中:遗传性的变异是绝对的,稳定性是相对的;在变异中:退化性的变异是大量的,进化性的变异是个别的。*,遗传标记的丢失,原有的典型性状的不典型等菌落及细胞形态的改变生长速度缓慢代谢产物生产能力下降,即负突变致病菌对宿主侵染力下降抗不良环境条件(抗噬菌体,抗低温)能力减弱*:基因自发突变退化是发生在群体细胞中的一个从量变到质变的逐步演变过程。自发突变率10-8-10-9加速退化的因素传代次数过多不适宜的培养条件*(1)控制传代次数(2)创造良好的培养条件:培养基;培养温度等保藏培养基:细菌:营养琼脂放线菌:高氏一号霉菌:察氏培养基酵母菌:YEPD高渗培养基。(3)利用不易衰退的细胞传代:霉菌、放线菌:无性孢子或有性孢子(4)采用有效的菌种保藏方法*,通过纯种分离和测定典型性状、生产性能等指标,从已衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体,以达到恢复原菌株固有性状的相应措施;广义复壮在菌种的典型特征或生产性状尚未衰退前,就经常有意识地采取纯种分离和生产性状的测定工作,以期从中选择到自发的正突变个体。也称生产育种*“分离小室”进行单细胞分离用显微操纵器进行单细胞分离用菌丝尖端切割法进行单细胞分离菌落纯(菌种纯)细胞纯(菌株纯)纯种分离法菌株:又称品系,表示任何由一个独立分离的单细胞(或单个病毒粒子)繁殖而成的纯种群体及其后代。因此,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。*18年2、通过宿主体复壮:病原菌3、“5406”农用抗生菌的分生孢子采用-10~-30℃的低温处理5~7天,使其死亡率达到80%左右,结果会在抗低温的存活个体中留下未退化的个体,从而达到复壮的效果。*(一)目的使微生物菌种保持原来的性状和活力不退化、不死亡、不被污染,便于研究、交换和使用。(二)原理挑选典型培养物(typicalculture)的优良纯种,并创造最有利于休眠的环境条件,使微生物处于代谢不活泼、生长受抑制的休眠状态。*18年措施低温:生长温度低限约为-30℃,水溶液中酶促反应温度低限-140℃干燥缺氧避光缺乏营养添加保护剂:甘油、脱脂牛奶、血清白蛋白添加酸度中和剂*18年(三):接种适宜斜面培养基→培养→4℃保藏措施:低温:4℃适用:各大类保藏期:1-6个月用橡皮塞代替棉塞,:斜面或半固体接种→培养→加无菌蜡液高出培养基1cm→4-15℃保藏措施:低温,隔氧适用:不能利用石油的各大类保藏期:1-2年优点:简便*18年