枸杞组培快速繁殖技术研究.doc

枸杞组培快速繁殖技术研究①本文通过对“宁杞2号”枸杞离体组织培养的研究,进行了丛生芽诱导,试管母本的建立,嫩梢增殖,生根状况分析及其移栽等方面的探讨,进而探索了组培快速繁殖以及生产上适用的组培技术,结果表明:改良MS+++++NAA1+,可加快增殖速度;以较短的根系移栽试管苗,既省工、省力,又能提高成活率,从而确立了一套较为理想的快速繁殖体系,为大规模工厂化育苗提供了可靠依据②选用“宁杞2号”,最适的愈伤组织诱导培养基为1/2MS++,最适的生根培养基是;1/2MS++.③本试验以枸杞嫩枝及顶芽作外植体进行组织培养。结果表明,不定芽诱导用MS+6-+;增殖培养基以MS+6-+;生根培养基为1/2MS(大量元素减半,其它成分不变)++%。④植物名称:宁夏枸杞(Lyciumbarbarum)材料类别:多年生植株上当年萌生出的嫩枝茎尖。培养条件:基本培养基为MS。长芽培养基中的激素成分为(毫克/升):①,KT1,②,BA1。蔗糖浓度为3%。生根培养基成分为1/2MS(大量元素减半),,,蔗糖浓度2%。培养温度25~30℃,自然光照。⑤MS和MS(1/2大量、微量元素全量)培养基均适于枸杞的培养、,激素以IBA浓度在0~×10-6mol/L均适其培养,×10-7mol/L效果最佳,(1/2大量、微量元素全量)+×10-5mol/L+×10-7mol/L(其他有机成分常量)是枸杞芽增殖与发根同步的最佳培养基.⑥枸杞属植物(LyciumhaminifoliumMill)花粉粒发育成胚和植株的形成已有报导。本文报导枸杞叶外植体的愈伤组织诱导及其植株的再生。从未开花植株上摘取无病虫害的叶片作材料,先用流水冲洗除去尘土,然后在70%的酒精中浸20秒左右,再在含万分之二昇汞和5%安替福民的溶液中消毒4~5分钟(消毒时间不能过长,以免伤害叶片)。用无菌水淋洗3~5次后,在无菌条件下将叶片横切成1厘米左右的切段,接种在Murashige和Skoog培养基上,培养基附加激动素(K),吲哚乙酸(IAA),IAA枸杞髓组织离体培养及高频率植株再生的研究*曹有龙陈放罗青曲琳摘要:枸杞髓组织在4种MS培养基上都能诱导出愈伤组织,%~100%。在培养基MS+6-+,呈颗粒状,分散性能好,胚性细胞多。将其转移到MS+6-+,小芽在MS+6-,繁殖系数50~150株/。丛生芽在MS+。关键词:枸杞;髓组织;离体培养;植株再生枸杞(LyciumbarbarumL.)是重要的药用植物,多年来,国内外科技工作者十分重视枸杞的组织培养,已有用叶片、花药、下胚轴、茎端及幼嫩子房为材料进行组织培养分化出植株的〔1,2,3〕,我们在此基础上,以枸杞髓组织为试验材料进行组织培养,获得了再生植株,为枸杞细胞突变体的筛选、细胞悬浮培养、原生质分离、细胞杂交、基因转移的研究提供依据。1 试验材料供试材料为宁夏农科院枸杞研究所培育的高产优质枸杞新品种——宁杞1号。 愈伤组织的诱导取当年生长的明显分化成髓组织的枝条,摘除叶子、侧芽和带有分生组织的顶端100mm,把外植体的切端蘸熔蜡封着伤口,然后浸入70%酒精中20s,%HgCl2溶液中,经过8~10min后,用无菌水冲洗3遍,最后以吸水纸吸干,从茎的两端各切除10mm,余下部分切成20mm的小段,用无菌镊子夹着茎的切段,用瓶塞打孔器从切段中取出圆柱体髓组织,并将其转移到90mm的无菌培养皿中,用解剖刀切成2~3mm厚的小圆片,接种到4种含不同激素的MS固体培养基上诱导愈伤组织发生。 愈伤组织的继代培养在P2培养基中加入500mg/L的水解酪蛋白作为继代培养的培养基。挑选色泽鲜艳、生长迅速的愈伤组织进行继代培养,每次20d,2~3次继代后,出现疏松颗粒状胚性愈伤组织