人凝血酶TM酶联免疫检测.doc

人凝血酶TM酶联免疫检测.DOC人凝血酶(TM)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人凝血酶(TM),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中凝血酶(TM)测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人凝血酶(TM)水平。向预先包被了人凝血酶(TM)单克隆抗体的酶标孔中加入人凝血酶(TM),温育;温育后,加入生物素标记的抗TM抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人凝血酶(TM)的浓度呈正相关。试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品1600U/××1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材37℃恒温箱。标准规格酶标仪。精密移液器及一次性吸头蒸馏水,一次性试管吸水纸注意事项从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差严格按照说明书的操作进行,,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。操作程序标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)800U/L5号标准品120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液400U/L4号标准品120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液200U/L3号标准品120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液100U/L2号标准品120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液50U/L1号标准品120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗TM抗体,链霉亲和素-