面包中菌落总数测定.doc

_面包中菌落总数测定实验十面包中菌落总数的测定一、目的要求学习掌握菌落总数测定的基本原理和方法,了解食品上微生物的分布和繁殖动态。二、实验说明菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。每种细菌都有它一定的生理特性,培养时应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质等)去满足其要求才能将各种细菌都培养出来。但在实际工作中,一般都只用一种常用的方法去作。细菌菌落总数的测定,所得结果,只包括一君能在营养琼脂上发育的嗜中温性需氧菌的菌落总数。三、实验材料培养箱36±1℃恒温水浴46±1℃、,。广口瓶500ml,有盖。玻璃珠直径5mm。。试管18×200mm。酒精灯。试管架。研钵。灭菌刀和剪刀。灭菌镊子。酒精棉球。玻璃蜡笔。营养琼脂培养基。灭菌生理盐水、分装于试管中,。方法步骤前期准备,到食堂买面包两份,记录其生产日期,批次,质量、感官等信息妥善处理。留做实验两份面包,一份买来便实验,另一份在常温下放一天,第二天测菌落数。两份对比。(一)检验稀释和培养1、以无菌操作,将检样25g(或25ml)剪碎放于灭菌研钵内,经充分研磨用成1:10的均匀稀释液。并测定其pH2、:,(注意吸管尖端不要触及管内液面),振摇试管混合均匀,作成1:100的稀释液。3、,按上述操作作10倍稀释,如此每递增稀释一次,。4、根据食品卫生要求或对标本污染程度的估计,选择2-3个适宜稀释度,分别作10倍递增稀释的同时,,每个稀释度作两个平皿。5、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃营养琼脂(可放于46×1℃水浴保温)注入平皿约15ml,并移动平皿使混合均匀。。6、待稀释液入平皿后,翻转平板,置36×1℃温箱内培养24±2h(面包)取出,计算平板内菌落数,乘以稀释倍数,即得每克(或ml)样品所含菌落总数。(二)计算方法1、平板菌落数的选择选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板应采用两上平板的平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落可计算半个平板后乘以代表全皿菌落数。2、稀释度的选择(1)应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以